植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌混菌發(fā)酵飼料對(duì)肉雞生長性能、屠宰性能和腸道結(jié)構(gòu)的影響

2021-04-26 16:48:26 點(diǎn)擊：

摘要：應(yīng)用發(fā)酵飼料是減抗替抗的一種有效方法，已經(jīng)得到了大家的共識(shí)。發(fā)酵飼料原料，甚至是全價(jià)飼料發(fā)酵的研究與應(yīng)用已成為行業(yè)發(fā)展的大趨勢(shì)。發(fā)酵飼料是以微生物、復(fù)合酶為發(fā)酵劑，將飼料原料轉(zhuǎn)化為微生物菌體蛋白、生物活性小肽類氨基酸、活性益生菌、復(fù)合酶制劑為一體的生物飼料。近年來，大量的研究表明發(fā)酵飼料可以改善動(dòng)物生產(chǎn)性能、提高動(dòng)物機(jī)體免疫力、改善腸道微生態(tài)平衡。用來生產(chǎn)發(fā)酵飼料的常用微生物主要有乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌、霉菌（黑曲霉和米曲霉）、糞鏈球菌等。乳酸菌是應(yīng)用最早、最廣泛的菌種，兼性需氧或嚴(yán)格厭氧條件下生長，能利用碳水化合物進(jìn)行發(fā)酵，主要產(chǎn)生乳酸。應(yīng)用乳酸菌發(fā)酵飼料過程中會(huì)產(chǎn)生大量乳酸，可改善飼料的適口性，降低ｐＨ，抑制腸道有害菌的生長，從而減少貯藏過程中干物質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)的損失。芽孢桿菌是一種好氧菌，可以將蛋白質(zhì)降解為小肽，將多糖降解為易吸收的低分子糖，從而提高動(dòng)物的生長速度和飼料利用率。在長期的實(shí)踐中，人們發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過程中有很多重要的生化反應(yīng)過程僅依靠單一的菌株是不能完成的，必須利用兩種或多種微生物共同作用完成，因此混合菌種發(fā)酵逐漸發(fā)展起來。近年來，利用混合菌種進(jìn)行發(fā)酵的研究越來越多，并取得了很好的效果。但是由于肉雞腸道相對(duì)短，如何在肉雞飼料中科學(xué)有效地應(yīng)用仍需要大量的試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證和研究。本試驗(yàn)選用植物乳桿菌和枯草芽孢桿菌對(duì)肉雞全價(jià)飼料進(jìn)行混菌發(fā)酵，并按一定比例添加在肉雞全價(jià)飼料中，研究其對(duì)肉雞生長性能、免疫功能和腸道發(fā)育的影響，為微生物發(fā)酵飼料在肉雞飼料中的推廣和應(yīng)用提供參考。

材料與方法

1 發(fā)酵飼料制備

在配制好的基礎(chǔ)日糧中添加由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室篩選并保藏的植物乳桿菌（活菌數(shù)1.0×10⁹CFU/g）和枯芽孢桿菌（活菌數(shù)1.0×10⁹CFU/g），加入30％蒸餾水混合均勻，裝入呼吸袋（PA/PE七層共擠膜，50cm×80cm）常溫（25～35℃）厭氧發(fā)酵5d。每個(gè)呼吸袋裝入發(fā)酵底物15kg。

2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所南口試驗(yàn)基地進(jìn)行。選擇1日齡健康愛拔益加（AA）雄性肉仔雞180只，隨機(jī)分為3組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。3組肉雞分別飼喂基礎(chǔ)日糧（F0，不發(fā)酵）、10％發(fā)酵飼料（F10，發(fā)酵飼料以10％的比例替代全價(jià)飼料）、20％發(fā)酵飼料（F20，發(fā)酵飼料以20％的比例替代全價(jià)飼料）?；A(chǔ)日糧采用玉米-豆粕-雜粕型日糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1；3組試驗(yàn)日糧常規(guī)養(yǎng)分含量（實(shí)測值）見表2，各組日糧均制成顆粒。

3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)分2個(gè)階段進(jìn)行，1~21日齡為試驗(yàn)前期，22~42日齡為試驗(yàn)后期。采用籠養(yǎng)，1~3日齡光照時(shí)間為24h/d，4~7日齡為23h/d，之后為16h/d。乳頭式飲水器供水，自由采食，常規(guī)免疫。

4 檢測指標(biāo)與方法

4.1 生長性能

于21和42日齡時(shí)，雞空腹１２ｈ后，以重復(fù)為單位進(jìn)行稱重，記錄采食量，計(jì)算1~21、22~42和1~42日齡的平均體重（ABW）、平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）。

4.2 屠宰性能

于42日齡時(shí)，每重復(fù)隨機(jī)選?。敝浑u，按《家禽生產(chǎn)性能名詞術(shù)語和度量統(tǒng)計(jì)法》（NY/T 823-2004）測定屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、腿肌率、胸肌率和腹脂率。計(jì)算公式為：

屠宰率（％）=（屠體重／宰前體重）×１００％；

全凈膛率（％）=（全凈膛重/宰前體重）×１００％；

半凈膛率（％）=（半凈膛重/宰前體重）×１００％；

腹脂率（％）=（腹脂重／（全凈膛重＋腹脂重））×１００％；

腿肌率（％）=（腿肌重／全凈膛重）×１００％；

胸肌率（％）=（胸肌重／全凈膛重）×１００％。

4.3 腸道絨毛長度和隱窩深度

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)選取體重接近平均體重的１只雞，取回腸、十二指腸和空腸，中段處剪下約1cm的腸段，用生理鹽水洗凈后放入４％甲醛固定液中固定。將固定好的樣品按病理檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。脫水、修剪、包埋、切片、染色、封片，采用ＢＡ２００Ｄｉｇｉｔａｌ數(shù)碼三目攝像顯微攝像系統(tǒng)對(duì)切片進(jìn)行圖像采集，采集４０倍圖片測定絨毛長度和隱窩深度，并計(jì)算絨毛長度／隱窩深度（V/C）。

5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用 SPSS 16.0 軟件的單因素方差分析（One－WayANOVA）對(duì)發(fā)酵飼料的替代水平進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，對(duì)差異顯著者采用 LSD 多重比較，顯著水平設(shè)為0.05。

結(jié)果

1 生長性能

由表3可知，在生長前期，F(xiàn)10組肉雞平均日采食量和料重比最低，顯著低于F20組（P＜0.05），對(duì)照組和F10組間差異不顯著（P＞0.05）。生長后期，F(xiàn)10組平均日增重最高，料重比與對(duì)照組差異不顯著（P＞0.05）；F20組料重比顯著高于其他兩組（P＜0.05）。從全期來看，與對(duì)照組相比，F(xiàn)10組肉雞平均日增重有增加的趨勢(shì)（P＝0.05），料重比顯著低于對(duì)照組和F20組（P＜0.05）。

2 屠宰性能

由表4可知，添加發(fā)酵飼料對(duì)肉雞的屠宰性能沒有顯著影響（P＞0.05）。

３小腸絨毛長度和隱窩深度

由表5可知，F(xiàn)20組42日齡肉雞的回腸隱窩深度顯著高于對(duì)照組和F10組（P＜0.05）；由表6可知，F(xiàn)10和F20組42日齡肉雞十二指腸絨毛長度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；由表7可知，F(xiàn)10和F20組42日齡肉雞十二指腸和空腸絨毛長度／隱窩深度顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

討論

生長性能是衡量發(fā)酵飼料是否有效的最重要的指標(biāo)。大部分研究結(jié)果表明發(fā)酵飼料對(duì)肉雞生長性能的影響是有正向作用的。舒剛等以枯草芽孢桿菌和保加利亞乳桿菌作為發(fā)酵菌種，日糧不制粒，粉料飼喂，添加不同比例的發(fā)酵飼料發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組和藥物組相比，日增重較高，料重比降低。倪玉嬌等將芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌作為發(fā)酵菌種，以棉籽粕、芝麻餅、DDGS為底物，常溫20℃發(fā)酵96h制得發(fā)酵飼料，當(dāng)發(fā)酵飼料用量為15％時(shí)，對(duì)肉仔雞平均日增重有顯著影響，用量為10％時(shí)，節(jié)省的飼料成本最多。張偉偉等采用白地霉、熱帶假絲紅酵母和啤酒酵母混菌發(fā)酵馬鈴薯渣，馬鈴薯渣發(fā)酵飼料能降低肉雞的料重比，提高飼料中蛋白質(zhì)的利用率。林麗花等指出，在1~4周齡黃羽肉雞日糧中用９％發(fā)酵豆粕替代普通豆粕，可提高肉雞平均日增重、降低料重比和死淘率。本試驗(yàn)添加發(fā)酵飼料后制粒，F(xiàn)10組全期的肉雞平均日增重與其他兩組相比有增加的趨勢(shì)，料重比顯著下降。原因可能是發(fā)酵過程使飼料中復(fù)雜的大分子物質(zhì)如淀粉、纖維素、蛋白質(zhì)等降解為動(dòng)物易消化吸收的小分子物質(zhì)單糖、雙糖、低聚糖和氨基酸，產(chǎn)生微生物菌體蛋白以及微生物代謝產(chǎn)物。20％比例替代組料重比顯著高于10％比例替代組，可能是因?yàn)槲⑸锷L會(huì)消耗營養(yǎng)物質(zhì)，添加比例過大會(huì)降低飼料的營養(yǎng)濃度，反而使肉雞生長性能下降。

屠宰性能是衡量肉雞肉用性能的主要指標(biāo)。祁瑞雪使用發(fā)酵豆粕替代普通豆粕（發(fā)酵豆粕含有地衣芽孢桿菌1.2×10⁷CFU/g，高活性酵母菌1.0×10⁷CFU/g），6％的發(fā)酵豆粕替代豆粕可顯著提高肉雞屠宰率、全凈膛率和腿肌率。本試驗(yàn)各處理組的屠宰性能沒有顯著差異。不同試驗(yàn)中發(fā)酵飼料應(yīng)用效果的結(jié)果不一致可能與發(fā)酵菌種、生產(chǎn)工藝、活菌數(shù)量及替代劑量、飼料是否滅菌或制粒等有關(guān)系。

小腸是肉雞對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行消化和吸收的主要場所，小腸絨毛發(fā)育的情況及其對(duì)養(yǎng)分的利用直接影響著機(jī)體的生長發(fā)育情況。腸道絨毛的長度與絨毛上的細(xì)胞數(shù)量呈顯著正相關(guān)，只有成熟的細(xì)胞才具備吸收養(yǎng)分的功能。因此，腸道絨毛長說明成熟細(xì)胞多，機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的吸收利用能力則強(qiáng)。隱窩深度反映了隱窩細(xì)胞的增殖率和成熟度。絨毛長度／隱窩深度可反映小腸的功能狀況，其值下降表明消化吸收功能下降，Missotten等使用植物乳桿菌發(fā)酵飼料飼喂肉雞，發(fā)酵飼料組空腸和回腸中段的絨毛長度較對(duì)照組分別提高了22.6％和16.0％。Sun等研究指出，發(fā)酵過程產(chǎn)生的小肽能夠改善斷奶仔豬腸道黏膜結(jié)構(gòu)，增加營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用效率。而未經(jīng)發(fā)酵的普通豆粕含較多的大豆蛋白和植物凝集素等抗原物質(zhì)，這些抗原物質(zhì)會(huì)給肉雞腸道造成損傷，使得腸絨毛上皮細(xì)胞的成熟數(shù)量減少、成熟速度緩慢，造成動(dòng)物消化吸收能力減弱，飼料未及時(shí)被消化而堆積在腸道內(nèi)引起內(nèi)容物發(fā)酵、有害菌大量繁殖，有害菌分泌的腸毒素反過來損傷腸道絨毛結(jié)構(gòu)，如此反復(fù)循環(huán)，阻礙肉雞的生長發(fā)育。本試驗(yàn)中，F(xiàn)20組42日齡肉雞的回腸隱窩深度顯著高于對(duì)照組和F10組。F10和F20組42日齡肉雞十二指腸絨毛長度、十二指腸和空腸的絨毛長度／隱窩深度均顯著高于對(duì)照組。由此可以推斷發(fā)酵飼料有利于絨毛上細(xì)胞的生長和成熟，從而使得養(yǎng)分吸收的面積變大，提高營養(yǎng)成分的吸收效率，這與發(fā)酵組具有較好的生長性能相對(duì)應(yīng)。

結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，發(fā)酵飼料以10％的比例替代全價(jià)飼料，肉雞全期的平均日增重有增加的趨勢(shì)，料重比顯著下降；以20％的比例替代全價(jià)飼料，肉雞的回腸隱窩深度顯著增加。發(fā)酵飼料以10％和20％的比例替代全價(jià)飼料，肉雞的十二指腸絨毛長度、十二指腸和空腸的絨毛長度／隱窩深度顯著高于對(duì)照組。

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