植物乳桿菌對(duì)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯品質(zhì)研究表明可提高乳酸菌數(shù)量和乳酸含量，保存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
摘 要：
本試驗(yàn)旨在研究接種低劑量植物乳桿菌對(duì)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量、瘤胃體外產(chǎn)氣特性以及開(kāi)包后發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量的影響。試驗(yàn)設(shè)2個(gè)處理，CK處理（不接種任何菌劑）和LP處理（接種
1×105CFU/g植物乳桿菌），發(fā)酵60d。結(jié)果表明：①與CK處理相比，LP處理的 pH、酸性洗滌纖維含量顯著降低（P＜0.05），乳酸含量顯著增加（P＜0.05），乳酸菌數(shù)量顯著增加（P＜0.05），好氧細(xì)菌數(shù)量顯著降低（P＜0.05）。②處理的有機(jī)物消化率顯著高于CK處理（P＜0.05）。③LP處理的pH在開(kāi)包后第0、4、8、12天顯著低于CK處理（P＜0.05），乙酸含量和乳酸菌數(shù)量在開(kāi)包后第8天顯著高于CK處理（P＜0.05），好氧細(xì)菌數(shù)量在開(kāi)包后第8天顯著低于CK處理（P＜0.05）。由此可見(jiàn)，在裹包全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯中添加低劑量植物乳桿菌能顯著降低全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯的pH、酸性洗滌纖維含量和好氧細(xì)菌數(shù)量，增加乳酸含量、乳酸菌數(shù)量和有機(jī)物消化率，并在開(kāi)包后有效減緩pH的上升。
引言：
構(gòu)樹(shù)又稱殼樹(shù)、褚樹(shù)等，為多年生落葉喬木，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，適應(yīng)性強(qiáng)，其葉片中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪含量高，粗纖維含量低，且富含各種氨基酸，是一種優(yōu)質(zhì)的非常規(guī)飼料資源。當(dāng)前，我國(guó)諸多地區(qū)都相繼開(kāi)展了雜交構(gòu)樹(shù)的栽培和利用研究，目前雜交構(gòu)樹(shù)莖葉分離機(jī)械作業(yè)成本高，不易實(shí)現(xiàn)，因此其主要以全株刈割進(jìn)行利用，雖全株構(gòu)樹(shù)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值低于葉片，但諸多研究通過(guò)發(fā)酵手段對(duì)全株構(gòu)樹(shù)進(jìn)行加工利用也能使育肥豬、肉牛、奶牛等表現(xiàn)出較好的生產(chǎn)性能。雜交構(gòu)樹(shù)的原料特征與苜蓿類似，表面附著乳酸菌數(shù)量較少（＜1×105cfu/g），干物質(zhì)和可溶性碳水化合物含量較低，緩沖能高，直接青貯較難成功，而添加外源微生物制劑尤其是乳酸菌制劑是改善青貯品質(zhì)最為便捷和有效的方式。植物乳桿菌屬同型發(fā)酵乳酸菌，生長(zhǎng)繁殖較快，對(duì)于發(fā)酵底物利用率高、競(jìng)爭(zhēng)力強(qiáng)，在發(fā)酵初期能夠產(chǎn)生大量乳酸，使得發(fā)酵體系迅速形成酸性環(huán)境，抑制有害微生物的生長(zhǎng)繁殖，最大程度地保存青貯原料的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，本研究目的是在實(shí)際生產(chǎn)作業(yè)中添加低劑量植物乳桿菌，研究其對(duì)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量、瘤胃體外產(chǎn)氣特性及有氧暴露過(guò)程中青貯發(fā)酵品質(zhì)和微生物數(shù)量的影響，為加工調(diào)制優(yōu)質(zhì)雜交構(gòu)樹(shù)青貯飼料提供指導(dǎo)，同時(shí)促進(jìn)本地區(qū)雜交構(gòu)樹(shù)的高效加工利用。
材料與方法：
1.試驗(yàn)材料
青貯原料于2020年9月份采自新疆維吾爾自治區(qū)石河子地區(qū)143 團(tuán)雜交構(gòu)樹(shù)種植示范基地人工種植的雜交構(gòu)樹(shù)待株高長(zhǎng)至1.5m左右，利用青飼料收獲機(jī)進(jìn)行全株收割粉碎，留茬高度為15-20cm，粉碎長(zhǎng)度1-2cm。植物乳桿菌購(gòu)自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心（CICC）。
2.試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)分為2個(gè)處理，分別為對(duì)照處理（CK處理，不添加任何菌劑）和植物乳桿菌處理（LP處理，添加1×105cfu/g植物乳桿菌）。將菌種在MRS液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，平板計(jì)數(shù)后確定其數(shù)量，按比例配制菌液，以鮮重為基礎(chǔ)進(jìn)行添加。 用水槍均勻地噴灑至待貯青貯原料表面（CK處理噴灑等量的水）。噴灑完畢后立刻混勻進(jìn)行裹包青貯，裹包完成后放置于室外發(fā)酵60d后開(kāi)包，隨后測(cè)定全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯的發(fā)酵品質(zhì)、微生物數(shù)量和瘤胃體外產(chǎn)氣模型參數(shù)，并在開(kāi)包后的第0（開(kāi)包當(dāng)天）、4、8、12天檢測(cè)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯的發(fā)酵品質(zhì)和微生物數(shù)量。
3. 綿羊瘤胃體外產(chǎn)氣分析
選擇3只健康、體重接近的哈薩克羊作為瘤胃液供體。試驗(yàn)飼糧由200g精料（玉米51%、麩皮24%、豆粕 18%、碳酸氫鈣2.5%、預(yù)混料2%、尿素1.5%、食鹽1%）和1.8 kg青貯玉米組成，每天晨飼，自由飲水，持續(xù)飼喂1個(gè)月。飼喂結(jié)束后，在晨飼前宰殺采集瘤胃液，采集時(shí)將瘤胃液以4層紗布初步過(guò)濾到預(yù)熱過(guò)的保溫瓶中，迅速帶回實(shí)驗(yàn)室處理，再次用4層紗布過(guò)濾瘤胃液后棄去過(guò)濾后的殘?jiān)?，置?9℃水浴鍋中待使用。參照Menke等的方法配制人工瘤胃液，將人工瘤胃液與瘤胃液以2:1的比例進(jìn)行混合，用分液器分別向所有培養(yǎng)管注入 30mL混合培養(yǎng)液，將培養(yǎng)管進(jìn)液端豎直向上排盡管內(nèi)氣體，用止水夾夾住前端硅橡膠管，并記錄相應(yīng)的初始刻度值（mL）。將培養(yǎng)管迅速放入已預(yù)熱（39℃）的水浴箱中，待加液完畢后所有培養(yǎng)管同時(shí)轉(zhuǎn)入人工瘤胃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 按照盧德勛等的方法測(cè)定第0（初始發(fā)酵時(shí)）、2、4、6、8、10、12、18、24、30、36、42、48h的產(chǎn)氣量，同時(shí)分析有機(jī)物消化率（OMD）和代謝能（ME）。
結(jié)果與分析：
1.植物乳桿菌對(duì)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯發(fā)酵品質(zhì)及微生物數(shù)量的影響
由表1可知，發(fā)酵60d時(shí)，LP和CK處理的pH和CP、WSC、NDF、ADF含量及酵母菌、霉菌、AB數(shù)量均顯著低于青貯原料（P＜0.05），NH3-N、AsH、LA、AA含量及LAB數(shù)量均顯著高于青貯原料（P＜0.05），DM、EE含量與青貯原料差異不顯著（P＞0.05）。發(fā)酵60d時(shí)LP處理的pH、ADF含量、AB數(shù)量顯著低于CK處理（P＜0.05），而LA含量、LAB數(shù)量顯著高于CK處理（P＜0.05），PA、BA在發(fā)酵結(jié)束時(shí)均未檢測(cè)出。CK處理和LP處理之間 NH3-N、DM、Ash、CP、WSC、NDF、AA含量57及酵母菌、霉菌數(shù)量均差異不顯著（P＞0.05）。
2.植物乳桿菌對(duì)全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯產(chǎn)氣量、有機(jī)物消化率、代謝能和產(chǎn)氣模型參數(shù)的影響
如圖2所示，隨著體外產(chǎn)氣時(shí)間的延長(zhǎng)，各處理產(chǎn)氣量逐漸升高，在48h達(dá)到頂峰。在發(fā)酵的0-48h，各處理在不同時(shí)間點(diǎn)的產(chǎn)氣量均差異不顯著（P＞0.05）。
由表2可知，LP處理的OMD、產(chǎn)氣速率顯著高于青貯原料和CK處理（P＜0.05）；青貯原料、CK處理和LP處理之間理論最大產(chǎn)氣量、產(chǎn)氣延滯時(shí)間和ME均差異不顯著（P＞0.05）。
3.植物乳桿菌對(duì)開(kāi)包后全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯發(fā)酵品質(zhì)和微生物數(shù)量的影響
由表3可知，LP和CK處理的pH、NH3-N含量及4類主要微生物（AB、LAB、酵母菌、霉菌）數(shù)量在開(kāi)包后逐漸增加，AA、PA含量呈先上升后下降的趨勢(shì)，僅LA含量隨開(kāi)包后時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減少。其中，LP處理的pH在開(kāi)包后第0、4、8、12天顯著低于CK處理（P＜0.05） 。LP處理的LA含量在開(kāi)包后第0天顯著高于CK處理（P＜0.05），AA含量在開(kāi)包后第8天顯著高于CK處理（P＜0.05）。LP處理的LAB數(shù)量在開(kāi)包后第0、8天顯著高于CK處理（P＜0.05），而AB數(shù)量則顯著低于CK處理（P＜0.05）。BA在開(kāi)包后未檢測(cè)出。CK處理和LP處理之間開(kāi)包后NH3-N、PA含量和酵母菌、霉菌數(shù)量差異均不顯著（P＞0.05）。
結(jié)論：
在實(shí)際裹包作業(yè)中接種1×105cfu/g植物乳桿菌可提高全株雜交構(gòu)樹(shù)青貯發(fā)酵中乳酸菌數(shù)量和乳酸含量，降低pH，抑制好氧細(xì)菌增殖，從而利于青貯營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的有效保存；且可通過(guò)促進(jìn)開(kāi)包8d內(nèi)乳酸菌的生長(zhǎng)和乙酸的生成，以維持酸性環(huán)境，減少好氧細(xì)菌生長(zhǎng)，延緩二次發(fā)酵；同時(shí)可顯著降低酸性洗滌纖維含量，提高有機(jī)物消化率。
產(chǎn)品介紹——加強(qiáng)型EM菌青貯飼料專用發(fā)酵劑，真正的專業(yè)菌種更好的青貯飼料發(fā)酵劑，發(fā)酵成功率高速度快，香醇可口，牛羊喜吃，連豬雞都搶吃
本品是一種以高濃度乳酸菌（300億/g）為主要原料加強(qiáng)型的專業(yè)青貯飼料發(fā)酵劑產(chǎn)品，適用于所有規(guī)模反芻動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)使用，培養(yǎng)后可進(jìn)行噴霧添加到青貯、微貯飼料固料中。與自然發(fā)酵或市場(chǎng)上一般EM菌比較，是為數(shù)不多的添加青貯飼料專業(yè)菌種：產(chǎn)丙酸丙酸桿菌、布氏乳桿菌、副干酪乳桿菌等的產(chǎn)品，具有：
1.發(fā)酵速度快，青貯發(fā)酵不易失敗。
2.增加分解秸稈纖維能力，縮短發(fā)酵時(shí)間，提高消化吸收率；
3.增加特殊酶和增香甜菌種，能夠提高青貯料香甜度和營(yíng)養(yǎng)；
4.具有抑制青貯料持續(xù)產(chǎn)酸生態(tài)菌群設(shè)計(jì)，適口性佳；
5.使用成本低廉，1包發(fā)酵2-3噸青貯秸稈飼料；
6.使用本產(chǎn)品制作的青貯飼料和微貯飼料飼喂動(dòng)物后，養(yǎng)殖場(chǎng)臭味、氨氣味等大幅度降低；
7.動(dòng)物排泄糞便中會(huì)殘留大量益生菌，糞便能夠自然加快發(fā)酵速度，形成良好益生環(huán)境。
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
大家都知道EM菌建議進(jìn)行青貯飼料，比自然發(fā)酵的飼料速度快，但水劑EM菌產(chǎn)品因無(wú)法長(zhǎng)時(shí)間保證復(fù)合酶制劑和乳酸菌等的活性而無(wú)法添加在產(chǎn)品中，因此發(fā)酵青貯、微貯飼料存在分解秸稈的纖維慢、存在持續(xù)產(chǎn)酸后期影響適口性等問(wèn)題。
本產(chǎn)品創(chuàng)新地采用固體EM菌設(shè)計(jì)，更方便運(yùn)輸。未使用前菌種處于休眠狀態(tài)，在水中激活后快速對(duì)數(shù)繁殖（30℃環(huán)境下24小時(shí)后每毫升含活菌總數(shù)≥100億cfu）產(chǎn)生發(fā)酵功能，因?yàn)榫哂锌焖俜纸饨斩挼睦w維能力發(fā)酵速度極快，發(fā)酵出來(lái)的青貯飼料不僅更香醇、營(yíng)養(yǎng)更豐富，且在密封狀態(tài)下可以保存1年以上不變質(zhì)。
牛羊等草食動(dòng)物對(duì)發(fā)酵出來(lái)的青貯飼料非常喜吃，由于發(fā)酵的料非常香醇，還可以直接飼喂母豬、雞、鴨、鵝等，實(shí)踐證明都非常愛(ài)吃和很好的飼養(yǎng)效果，節(jié)約很多的飼料。動(dòng)物食用后由于糞便中還存在大量的益生菌等，養(yǎng)殖場(chǎng)的臭味和氨氣等大大降低，糞便能夠自然快速發(fā)酵，形成生態(tài)養(yǎng)殖。
【用法用量】
將本產(chǎn)品1包（200克）與200克以上紅糖（數(shù)量越多效果越好，白糖、葡萄糖）溶于10-50公斤的水中（根據(jù)秸稈的含水量適當(dāng)增減，低溫季節(jié)建議用35℃左右的溫水），24小時(shí)以上再用水稀釋或者直接噴入2-3噸秸稈青貯料中（可以一邊填料一邊噴入），將秸稈填入發(fā)酵池或容器中，一定要壓實(shí)并采用至少雙層膜密封頂部和采料的側(cè)面，保證密封性。
一般24小時(shí)后就會(huì)明顯升溫，3天左右產(chǎn)生高溫，并有香醇的發(fā)酵味溢出，一般發(fā)酵20天以上才開(kāi)封使用 ，如果用于喂豬、雞、鴨、鵝等建議發(fā)酵30天以上才使用。每次取用青貯料后，都要再次密封。
由于本品中加入了特別的復(fù)合酶制劑，也可以對(duì)秸稈不需要鍘切，整條進(jìn)行青貯發(fā)酵，只要壓實(shí)密封即可。發(fā)酵時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，達(dá)到株桿糜爛成微微泥狀即可使用。
運(yùn)用加強(qiáng)型EM菌青貯飼料發(fā)酵劑不鍘草青貯飼料現(xiàn)場(chǎng)
用于喂豬、雞、鴨、鵝等的青貯飼料，開(kāi)啟后要透氣一小時(shí)以上，以不超過(guò)30%的比例與其它飼料混合后飼喂 。
【包裝規(guī)格】200g /包，80包/箱，市場(chǎng)售價(jià)約15-20元/包。
【貯 存】陰涼、干燥保存，由于高含量微生物制劑需要豐富的培養(yǎng)輔料，本產(chǎn)品中附帶了高級(jí)微生物激活后開(kāi)口培養(yǎng)輔料，有可能會(huì)造成對(duì)產(chǎn)品的板結(jié)，但不會(huì)影響使用效果，只要將本產(chǎn)品溶于水中后即可使用。
青貯飼料幾點(diǎn)核心操作提示：
1.堆的高度和寬度太小，發(fā)酵和保存都比較難，不易長(zhǎng)時(shí)間保存，建議每次發(fā)酵不低于3立方。
2.一定要壓實(shí)，一邊噴入菌液一邊壓實(shí)，底部溢出的水不要管它，讓其流走即可。
3.要至少采用2層薄膜覆蓋進(jìn)行密封，最底部邊緣要將薄膜往墊料底部插入，最大限度地保證起密封。
4.開(kāi)封使用后，每次取料后要將開(kāi)口處再次密封起來(lái)，確保不變質(zhì)。
【保 質(zhì) 期】12個(gè)月（于通風(fēng)、陰涼、干燥處存放）
聯(lián)系地址：廣西南寧市安吉路35號(hào)A棟26號(hào)（南寧市飼料獸藥禽苗市場(chǎng)內(nèi)）
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