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導(dǎo)讀

益生菌是一種能夠抑制有害菌生長(zhǎng)繁殖，改善腸道菌群平衡，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，提高宿主健康水平及飼料轉(zhuǎn)化率，無(wú)毒、無(wú)害、無(wú)殘留、安全、無(wú)副作用的微生物添加劑。益生菌大體上可以分為三大類: 乳桿菌屬、雙歧桿菌屬及部分革蘭氏陽(yáng)性球菌，另外還包括明串球菌屬、丙酸桿菌屬、芽孢桿菌屬及部分益生真菌。益生菌作為飼料添加劑對(duì)動(dòng)物的促生長(zhǎng)作用已被廣泛認(rèn)可，但也存在著很多問(wèn)題，如適宜作為益生菌的菌種數(shù)量仍較少; 活菌制劑進(jìn)入動(dòng)物腸道后易受鹽酸、膽汁酸等影響，難以發(fā)揮較好的作用; 活菌制劑在加工、運(yùn)輸和貯存中易失去活性，使用效果降低等。其中，益生菌制劑活菌數(shù)量是其產(chǎn)品質(zhì)量和活性檢測(cè)的重要指標(biāo)之一，但極易受到吸附載體、溫度、制劑類型及貯存條件的影響，從而影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性和使用效果。有報(bào)道顯示，在40 ℃恒溫條件下貯存3個(gè)月，益生菌活菌數(shù)量可急劇下降5 個(gè)數(shù)量級(jí); 室溫條件下貯存24 個(gè)月，活菌數(shù)量下降不超過(guò)2 個(gè)數(shù)量級(jí); 低溫(0～4 ℃) 條件下存貯，活菌數(shù)量基本保持穩(wěn)定。如何制備穩(wěn)定的菌劑，使其能夠長(zhǎng)期貯存并保持其活菌數(shù)量，是目前益生菌制劑產(chǎn)業(yè)亟需解決的問(wèn)題之一。

短短芽胞桿菌(Brevibacillus brevis)是一種革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，蛋白分泌能力強(qiáng)，不含內(nèi)毒素，在臨床和環(huán)境應(yīng)用方面安全，目前在生物防制、微生物保鮮及微生物降解等方面應(yīng)用廣泛，但關(guān)于其在益生菌方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。Che 等研究發(fā)現(xiàn)，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 首次被發(fā)現(xiàn)可以降低斷奶仔豬的料重比、腸道大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量，提高乳酸菌含量。但目前對(duì)利用該菌株制備益生菌劑的研究還未開(kāi)展，為獲得短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 益生菌制劑的最佳制備方法，本研究探索了穩(wěn)定劑、防腐劑、鹽濃度和pH 對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA制劑保存特性的影響、貯存過(guò)程中活菌數(shù)及抑菌能力變化，同時(shí)開(kāi)展了該菌株芽孢產(chǎn)率及耐熱性、抗生素敏感、抑菌及胃腸道環(huán)境耐受力的評(píng)估，旨在為擴(kuò)大其應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1.1 材料

11.1 供試菌

株短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA由本實(shí)驗(yàn)室篩選鑒定; 靶標(biāo)菌株: 金黃色葡萄球菌( Staphylococcus aureus) 、大腸桿菌( Escherichia coli)及沙門氏菌( Salmonella) 均由福建省疾病預(yù)防控制中心提供。

1.1.2 培養(yǎng)基

發(fā)酵培養(yǎng)基: 豆餅粉3%、蔗糖2%、可溶性淀粉0.8%、CaCl20.5%、蛋白胨0.2%，pH7.0～7.2，由實(shí)驗(yàn)室自行配制。

1.1.3 溶液配制

人工胃液: 在約800 mL 水中加入稀鹽酸16.4 mL，加入10 g 胃蛋白酶( 10 000 NFU/mg) 搖勻，加水稀釋成1 000 mL，調(diào)pH 至3.0，用0.22 μm 無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾除菌待用; 人工腸液: 磷酸二氫鉀6.8 g，加500 mL 水溶解，用0.1 mol /L 氫氧化鈉溶液調(diào)pH 至6.8，另取胰蛋白酶( 250 NFU/mg) 1g，加適量水溶解，兩液混勻后，加水稀釋至1 000 mL，0.22 μm 無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾除菌待用。

1.2 方法

1.2.1 不同穩(wěn)定劑對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA

貯存的影響將黃原膠、瓊脂、海藻酸鈉、海藻酸鉀、海藻酸銨、卡拉膠、羧甲基纖維素鈉、海藻酸丙二醇酯8 種穩(wěn)定劑( 終濃度為2.0‰) 分別與發(fā)酵液混合，室溫放置3 d 后，觀察制劑外觀形態(tài)并測(cè)定穩(wěn)定性。將初篩得到的穩(wěn)定劑進(jìn)行復(fù)篩，使其終濃度為0.5‰、1.0‰、1.5‰、2.0‰，室溫放置3 d 后，觀察制劑外觀形態(tài)并測(cè)定穩(wěn)定性。

1.2.2 不同NaCl 濃度對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA保存特性的影響

分別取100 mL 發(fā)酵液于150 mL 三角瓶中，添加0、2%、4%、6%、8%和10%NaCl，以不加NaCl 為對(duì)照。分別在0、5、10、15、20、25、30 d 取樣，稀釋后涂布于NA 平板，重復(fù)3 次，30℃培養(yǎng)48 h，統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，計(jì)算存活率及雜菌率。存活率( %) = Nt/N0×100%，式中，Nt，貯存不同時(shí)間的活菌數(shù); N0，0 d 的活菌數(shù); 雜菌率( %) = 雜菌數(shù)/( 短短芽胞桿菌數(shù)+雜菌數(shù)) ×100%。

1.2.3 不同pH 對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 保存特性的影響

分別取100 mL 發(fā)酵液于150 mL的三角瓶中，在pH 分別為1.0、3.0、5.0、7.0、9.0 和11.0 下常溫保存，分別在0、5、10、15、20、25、30 d 取樣，稀釋后涂布于NA 平板，重復(fù)3 次，30 ℃ 培養(yǎng)48 h，統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，計(jì)算存活率及雜菌率。

1.2.4 不同防腐劑對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA保存特性的影響

分別取100 mL 發(fā)酵液于150mL 的三角瓶中，分別添加終濃度為0.1‰的雙乙酸鈉、苯甲酸、苯甲酸鈉、丙酸銨、山梨酸、山梨酸鉀、山梨酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鉀、檸檬酸鈉、檸檬酸鈣11種防腐劑，對(duì)照組不添加任何防腐劑，常溫保存，分別在0、5、10、15、20、25、30 d 取樣，稀釋后涂布于NA 平板，重復(fù)3 次， 30 ℃培養(yǎng)48 h，統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，計(jì)算存活率及雜菌率。

1.2.5 長(zhǎng)期貯存過(guò)程中膠懸劑活菌數(shù)及抑菌能力的變化

取200 mL 發(fā)酵液于250 mL 藍(lán)口瓶中，添加0.1‰檸檬酸鈣、2‰黃原膠，并分別添加0、3%、6%、9%、12%、15%NaCl，調(diào)節(jié)pH 為7.0，常溫保存，分別于0、10、30、60、90、120、150、180、210、240、270、300 d 取樣。稀釋后涂布于NA 平板，重復(fù)3次， 30 ℃培養(yǎng)48 h，統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)。同時(shí)，取10、60、120、180、300 d 進(jìn)行抑菌效果檢測(cè)。

1.2.6 短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 的體外益生效果

1.2.6.1 菌懸液制備

將菌株活化2 次后接種于NA 液體培養(yǎng)基中，30 ℃、170 r /min 下振蕩培養(yǎng)48 h，置于80 ℃水浴15 min，7 000 g 離心10 min，收集菌體; 采用PBS 緩沖液洗滌2 次，并用PBS 緩沖液懸浮即為菌懸液。

1.2.6.2 產(chǎn)芽孢率及耐熱性

將菌株活化2 次后接種于NA 液體培養(yǎng)基中，30 ℃、170 r /min 振蕩培養(yǎng)，分別在24、48、72 h 取樣，測(cè)定產(chǎn)芽孢率; 取菌懸液1 mL，加入到9 mL PBS 溶液中，充分混勻后，100℃加熱0、2、5、10、15、20、30 min 后，以無(wú)菌生理鹽水按1 ∶ 10 梯度稀釋，進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算存活率。

1.2.6.3 人工胃腸液及膽鹽耐受性

取菌懸液1mL 加入到9 mL 人工胃液及人工腸液中，充分混勻后， 37 ℃、170 r /min 振蕩培養(yǎng)3 h，分別于0、3 h 取樣，以無(wú)菌生理鹽水按1 ∶ 10 梯度稀釋，進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算存活率。在LB 液體培養(yǎng)基中加入0.3%( W/V) 的豬膽鹽，121 ℃滅菌20 min。取1 mL菌懸液于培養(yǎng)基中，37 ℃、170 r /min 振蕩培養(yǎng)24 h，分別于0、24 h 取樣，將無(wú)菌生理鹽水按1 ∶ 10 梯度稀釋，進(jìn)行平板菌落計(jì)數(shù)并計(jì)算存活率。

1.2.6.4 抑菌作用及抗生素敏感性

將100 mL09% NA 培養(yǎng)基熔化并冷卻到50 ℃后，加入100 μL菌濃度為1×107CFU/mL 指示菌株發(fā)酵液，渦旋震蕩后傾覆在預(yù)先已凝固的NA 下層培養(yǎng)基上。靜置數(shù)分鐘后，在雙層培養(yǎng)基平板上打孔，分別向每個(gè)孔內(nèi)加入無(wú)菌水及發(fā)酵上清液各100 μL，以無(wú)菌水為空白對(duì)照， 37 ℃培養(yǎng)24 h，重復(fù)3 次，觀察菌株生長(zhǎng)情況并測(cè)量抑菌圈直徑。

1.2.6.5 抗生素敏感試驗(yàn)

將含有定量抗生素的濾紙片( 頭孢唑林30 μg /片、氨芐西林10 μg /片、慶大霉素10 μg /片、紅霉素15 μg /片、氯霉素30 μg /片、鏈霉素10 μg /片、四環(huán)素30 μg /片、利福平5 μg /片、新霉素30 μg /片、多黏菌素B 30 μg /片)貼在已接種了短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 的NA培養(yǎng)基上， 30 ℃培養(yǎng)24 h，重復(fù)3 次，觀察生長(zhǎng)情況并測(cè)量抑菌圈直徑。

1.3 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010 和SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，One-Way ANOVA 進(jìn)行單因素方法分析，Duncan 氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1 短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 膠懸劑的制備

2.1.1 穩(wěn)定劑對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 膠懸劑的影響

由圖1 可知，將2.0‰穩(wěn)定劑與發(fā)酵液混合，室溫放置3 d 后發(fā)現(xiàn)，黃原膠與瓊脂膠懸效果最好，無(wú)上下分層，穩(wěn)定性良好。對(duì)黃原膠和瓊脂進(jìn)行復(fù)篩發(fā)現(xiàn)，1.0‰、1.5‰、2.0‰黃原膠質(zhì)地均勻，無(wú)上下分層，穩(wěn)定性良好，其中2‰黃原膠沉淀率最高為26.89%，穩(wěn)定性最好; 0.5‰、1.0‰、1.5‰、2.0‰瓊脂均出現(xiàn)結(jié)塊分層現(xiàn)象( 圖2) 。因此，選用2.0‰黃原膠為穩(wěn)定劑以保證膠懸劑的穩(wěn)定性。

2.1.2 NaCl 濃度對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA膠懸劑的影響

由圖3 可知，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，活菌數(shù)呈遞減的趨勢(shì)。當(dāng)發(fā)酵液NaCl 濃度為4%時(shí)，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 初始活菌數(shù)為2.43×107CFU/mL，保存5、10、15、20、25、30 d 時(shí)，活菌數(shù)顯著下降( P＜0.05) ，分別為44．31%、55．14%、39.64%、28.26%、16.05%、22.63%，30 d 時(shí)活菌數(shù)量高于其他NaCl 濃度且無(wú)雜菌?？紤]到發(fā)酵液存放期間盡可能保持活菌數(shù)和減少雜菌率，選擇4%NaCl 進(jìn)行長(zhǎng)期存放。

2.1.3 pH對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 膠懸劑的影響

由圖4 可知，當(dāng)pH 調(diào)至1.0 時(shí)，在保存30 d 后，活菌數(shù)顯著下降為0.53 × 107CFU/mL( P＜0.05) ，但存活率仍為15．01%，說(shuō)明短短芽胞桿菌FJA-1501-BPA 在強(qiáng)酸條件也能生存; 將發(fā)酵液pH調(diào)至3.0 時(shí)，活菌數(shù)較多，當(dāng)發(fā)酵液pH 調(diào)至5.0、7.0、9.0、11.0 處理30 d 后，活菌數(shù)分別為2.53×107、1.00×107、0.57×107、1.77×107CFU/mL; 當(dāng)pH 調(diào)至7.0時(shí)，貯存10 d 時(shí)，其活菌數(shù)最多，顯著高于貯存0、5、15、20、25 和30 d( P＜0.05) ，綜合考慮細(xì)胞滲透壓平衡和貯存時(shí)間，最終選擇將發(fā)酵液pH 調(diào)至7.0 時(shí)進(jìn)行長(zhǎng)期存放，盡可能保持活菌數(shù)和減少雜菌率。

2.1.4 防腐劑對(duì)短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 膠懸劑的影響

由表1 可知，在處理30 d 后，不同防腐劑處理組的活菌數(shù)略有不同，但活菌數(shù)均在1×106CFU/mL 以上且無(wú)污染雜菌。這可能是短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 自身產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)對(duì)其控制雜菌污染產(chǎn)生作用。因此，選擇0.1‰雙乙酸鈉、0.1‰山梨酸鉀、0.1‰檸檬酸鈣添加于發(fā)酵液中，進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

2.2 長(zhǎng)期貯存過(guò)程中短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 活菌數(shù)及抑菌能力變化

2.2.1 活菌數(shù)

隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，活菌數(shù)略有增加，其結(jié)果見(jiàn)表2。由表2 可知，初始第0 天，鹽濃度為0、3%、6%、9%、12%、15%時(shí)的活菌數(shù)分別為8.08、8.10、8.10、8.08、8.07、8.08 log( CFU/mL) ; 保存300 d后，活菌數(shù)分別為8.76、8.62、8.70、8.67、8.46、8.52 log( CFU/mL) 。同一濃度保存不同時(shí)間，活菌數(shù)顯著升高( P＜0.05) ，但總體來(lái)說(shuō)，添加一定量的NaCl 有利于短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA的長(zhǎng)期貯存。

2.2.2 抑菌能力

由表3 ～ 5 可知，同一NaCl 濃度下，隨著貯存時(shí)間的延長(zhǎng)，該菌株對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的抑菌活性有所降低，但不同的鹽濃度對(duì)長(zhǎng)期貯存后的抑菌活性影響不大，因而制備菌劑時(shí)，選擇4% NaCl 進(jìn)行貯藏。

2.3 短短芽胞桿菌膠懸劑益生特性評(píng)價(jià)

2.3.1 發(fā)酵水平

由表6 可知，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 在發(fā)酵72 h 時(shí)，孢子數(shù)顯著高于發(fā)酵24 及48 h( P＜0.05) ，發(fā)酵24、48 及72 h 產(chǎn)孢率分別是0.87%、7.58%、60.82%，說(shuō)明該菌株具有良好的產(chǎn)芽孢能力。

2.3.2 耐熱性

由表7 可知，在100 ℃加熱0、2、5、10、15、20、30 min 后，菌株耐熱率分別為100.00%、36.41%、12.66%、1.97%，加熱15、20、30min 后，菌株耐熱率均＜1%，加熱30 min 后活菌數(shù)仍達(dá)到3.06 log( CFU/mL) ，說(shuō)明該菌株具有一定的耐熱性。

2.3.3 人工胃腸液和豬膽鹽耐受性

由表8 可知，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 在人工胃液中保持3 h 后存活率為23.16%，活菌數(shù)量有一定的降低，說(shuō)明其對(duì)人工胃液中具有一定的耐受性; 在人工腸液中作用3 h 后，其存活率達(dá)到48.62%，說(shuō)明該菌株對(duì)人工腸液具有良好的耐受性; 該菌株在豬膽鹽環(huán)境中耐受性最好，在0.3%( W/V) 的豬膽鹽環(huán)境中培養(yǎng)24 h 后，菌株生長(zhǎng)良好，存活率達(dá)到98.83%。

2.3.4 抑菌譜

由圖5 可知，該菌株對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌的抑菌圈直徑分別為21.42、21.33、15.83 mm，說(shuō)明，該菌株對(duì)動(dòng)物病原菌具有較好地抑制作用。

2.3.5 抗生素敏感性

由圖6 可知，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 對(duì)紅霉素、頭孢唑林和慶大霉素極度敏感，其抑菌圈大小均達(dá)20 mm，對(duì)新霉素、利福平、氯霉素、四環(huán)素和多黏菌素B 高度敏感，抑菌圈直徑為15～20 mm; 對(duì)鏈霉素中度敏感，抑菌圈直徑為10.1～15.0 mm; 對(duì)氨芐西林為耐藥。

3討論

延長(zhǎng)益生菌制劑的保質(zhì)期，控制雜菌率有多種方法，如控制溫度、pH、鹽度及添加防腐劑等。菌活力強(qiáng)、活菌數(shù)量大，才能有效維持胃腸道微生物生態(tài)環(huán)境平衡，發(fā)揮最大的益生作用。郭照輝在進(jìn)行畜禽用凝結(jié)芽孢桿菌( Bacillus coagulan) 液體菌劑雜菌控制及保存期初步研究時(shí)，在凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵液中添加0.5%苯甲酸鈉，調(diào)節(jié)發(fā)酵液pH 為4.0，置陰涼干燥處常溫保存270 d 發(fā)現(xiàn)，菌株存活率為40.06%，凝結(jié)芽孢桿菌是一種同型乳酸發(fā)酵的綠色微生物飼料添加劑，在酸性條件下( pH 4.0) ，凝結(jié)芽孢桿菌孢子對(duì)熱幾乎沒(méi)有耐受性，而且生長(zhǎng)受到抑制。而短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 在pH 3.0 ～ 15.0 時(shí)均能生長(zhǎng)，其生長(zhǎng)的pH 范圍比目前報(bào)道的益生菌菌株更廣，因而可能更適合作為益生菌菌株進(jìn)行應(yīng)用。此外，本研究選擇使用0.1‰檸檬酸鈣、0.1‰山梨酸鉀、0.1‰雙乙酸鈉3 種防腐劑組合并且添加4% NaCl，為增強(qiáng)產(chǎn)品的穩(wěn)定劑還添加了2.0‰黃原膠，常溫保存300 d 時(shí)，菌株存活率為100%，明顯優(yōu)于郭照輝研究結(jié)果。因此，本研究提供了一種益生菌液體制劑保存的新方法，可以延長(zhǎng)菌劑的貯藏時(shí)間，便于運(yùn)輸。

芽孢桿菌作為益生菌飼料添加劑的核心組成成分，其自身益生效果的優(yōu)劣是決定后期發(fā)酵產(chǎn)品最終應(yīng)用效果的關(guān)鍵因素。產(chǎn)芽孢率高、耐熱性強(qiáng)且能在工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)后保持一定數(shù)量的活菌是作為益生菌條件之一。王巧麗等研究發(fā)現(xiàn)，豬源益生羅伊氏乳桿菌在70 ℃水浴培養(yǎng)2 min 時(shí)菌株基本死亡，而高書鋒等研究發(fā)現(xiàn)，凝結(jié)芽孢桿菌W-02 益生菌在80 ℃水浴30 min，活菌數(shù)為1×105～1×106CFU/mL。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 在100 ℃ 水浴加熱30 min，活菌數(shù)仍為3.06 log( CFU/mL) ，由此可知，短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 耐熱性優(yōu)于乳酸桿菌，可以保證其發(fā)酵后存活足夠數(shù)量的菌體。胃酸和膽汁具有抗菌作用，益生菌只有能夠抵御低pH 和高膽汁鹽時(shí)才能在腸道內(nèi)存活并正常發(fā)揮生理作用。短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 在人工胃液、腸液、0.3%豬膽鹽培養(yǎng)3、3、24 h 后菌株存活率分別為23.16%、48.62%、98.83%，其在人工胃腸液中存活率雖較低但不致死。閔鐘熳等發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌B5329、B22、B544，在人工胃液中處理4 h，存活率分別為12.02%、7.94%、6.03%，在人工腸液、0.3%豬膽鹽中存活率維持在較高的水平。本試驗(yàn)中短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 與上述3 株芽胞桿菌一樣具有耐胃腸液及膽鹽能力，能夠在腸道內(nèi)存活。維持腸道微生態(tài)平衡是益生菌的作用之一，故益生菌菌株要具備抑制病原菌的特性。短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的抑菌圈直徑分別為21.42、21.33、15.83mm，與李善仁等的研究結(jié)果一致，其發(fā)現(xiàn)3 株芽孢桿菌作為益生菌對(duì)腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌的平均抑菌圈直徑分別為15.56、15.50、23.55mm。以目前畜牧養(yǎng)殖現(xiàn)狀來(lái)看，不同動(dòng)物的不同生長(zhǎng)階段還需要添加一定量的抗生素，所以需要考慮抗生素與益生菌是否存在協(xié)同作用。短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 對(duì)鏈霉素、氨芐西林不敏感; 而對(duì)紅霉素、頭孢唑啉、慶大霉素、新霉素、利福平、氯霉素、四環(huán)素和多黏菌素B 均較敏感。李雅麗等發(fā)現(xiàn)6 株芽孢桿菌對(duì)鏈霉素、氨芐西林等10 種常用飼用抗生素均較敏感，建議避免與抗生素同時(shí)使用。短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 可能攜帶了鏈霉素、氨芐西林耐藥性基因，該菌株與此類抗生素可以在飼料中同時(shí)添加，互不影響。

4結(jié)論

添加4%NaCl、0.1‰檸檬酸鈣、0.1‰山梨酸鉀、0.1‰雙乙酸鈉、2.0‰黃原膠，調(diào)節(jié)pH 為7，可獲得長(zhǎng)期保存的短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 膠懸劑配方，有望為益生菌液體制劑的制備提供新的方法。短短芽胞桿菌FJAT-1501-BPA 對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌3 種腸道病原菌具有抑制作用，具有產(chǎn)孢率高、耐熱性強(qiáng)、耐酸、耐膽鹽的特性，可與鏈霉素、氨芐西林同時(shí)使用，具備了優(yōu)良益生菌的條件。