在抗生素污染問(wèn)題越來(lái)越嚴(yán)重的今天，過(guò)多藥物的應(yīng)用造成仔豬腸道菌群平衡紊亂，使一些非致病菌死亡，腸道菌群平衡失調(diào)，從而引起長(zhǎng)期腹瀉或者缺乏維生素等反應(yīng)，造成動(dòng)物體傷害，發(fā)酵飼料的應(yīng)用，是解決抗生素問(wèn)題的一個(gè)有效方案。在飼料中添加有益微生物使其大量繁殖，先進(jìn)行體外消化，分解飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)動(dòng)物采食后，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到充分吸收，有益微生物又可定殖在腸道中，從而改善仔豬的腸道結(jié)構(gòu)，彌補(bǔ)了早期斷奶帶來(lái)的缺點(diǎn)。

含有乳酸菌、枯草芽孢桿菌，總均數(shù)5×10¹⁰CFU/g。

選用28日齡大白×長(zhǎng)白二元雜交斷奶仔豬27頭，按體重相近原則隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭仔豬。試驗(yàn)I組為對(duì)照組（PD），飼喂基礎(chǔ)日糧；試驗(yàn)Ⅱ組飼喂基礎(chǔ)日糧+20%過(guò)夜水；試驗(yàn)Ⅲ組為發(fā)酵飼料組(ND+P)飼喂基礎(chǔ)日糧+20%過(guò)夜水+菌液。預(yù)飼期為7d，試驗(yàn)期為15d。仔豬采用分欄飼養(yǎng)。自由采食和飲水。豬舍溫度保持在28℃左右。

試驗(yàn)結(jié)束的最后1d，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)挑選1頭體重適中的健康仔豬進(jìn)行屠宰，剖腹取腸段（分別為十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸），兩頭結(jié)扎，立即帶回實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。于超凈工作臺(tái)上稱取1g腸內(nèi)容物于無(wú)菌試管中，加入滅菌生理鹽水9mL，用渦旋振蕩器振蕩30s，此為10-1，依次進(jìn)行10-3～10-7稀釋。

用微量取液器分別取十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物10-4～10-6 稀釋液0.1mL，涂布接種于麥康凱NO.3培養(yǎng)基平皿上（各稀釋度設(shè)3個(gè)重復(fù)，并編號(hào)），置37oC培養(yǎng)箱中有氧培養(yǎng)24h后，選取粉紅色或紅色，表面光滑、凸起，邊緣整齊不透明，質(zhì)地軟、粘、直徑1.0～3.0mm的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，并進(jìn)一步作生化鑒定。

用微量取液器分別移取十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和盲腸內(nèi)容物10-5～10-7稀釋液0.1mL，涂布接種于改良MC瓊脂培養(yǎng)基平皿上（各稀釋度設(shè)3個(gè)重復(fù)，并編號(hào)），置37oC培養(yǎng)箱中有氧培養(yǎng)48h后，選取乳白色，稍偏黃，表面光滑、凸起，邊緣整齊不透明，質(zhì)地軟，直徑0.6～2.7mm的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，并進(jìn)一步作生化鑒定。

用微量取液器分別移取十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸和盲腸內(nèi)容物10-5～10-7稀釋液0.1mL，涂布接種于 LB 瓊脂培養(yǎng)基平皿上（各稀釋度設(shè)3個(gè)重復(fù)，并編號(hào)），置37℃培養(yǎng)箱中有氧培養(yǎng)24h后，選取乳黃色，正面中間有環(huán)形褶皺，表面光滑濕潤(rùn)，邊緣整齊不透明的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，并進(jìn)一步作生化鑒定。

另取仔豬各腸段內(nèi)容物0.5g放入裝有4.5mL滅菌蒸餾水的試管中，在微量振蕩器上震蕩20min，用PHS-3C酸度計(jì)進(jìn)行pH的測(cè)定。

所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析均采用Excel 2003和SPSS 13.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，用ANOVA進(jìn)行單因素方差分析，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示，差異顯著者采用Duncan氏方法進(jìn)行多重比較。

發(fā)酵飼料對(duì)斷奶仔豬腹瀉率的影響見(jiàn)表2。由結(jié)果可以看出，Ⅲ組比Ⅰ組腹瀉率降低了10.37%（P＜0.05），Ⅱ組比Ⅰ組降低6.67%（P＜0.05），Ⅲ組比Ⅱ組降低了3.7%（P＜0.05）。

結(jié)果顯示見(jiàn)表3。Ⅲ組中空腸的 pH 比Ⅰ組降低了7.82%（P＜0.05），比Ⅱ組降低了9.19%（P＜0.05）；Ⅲ組中回腸的pH比Ⅱ組降低了5.3%（P＜0.05）；Ⅲ組中結(jié)腸的 pH 比Ⅰ組降低了7.66%（P＜0.05）；其他腸段及組間pH差異不顯著（P＞0.05）。

結(jié)果顯示見(jiàn)表4。Ⅲ組十二指腸、空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸中乳酸桿菌的數(shù)量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組（P＜0.05）；Ⅲ組回腸、結(jié)腸中的芽孢桿菌數(shù)量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組（P＜0.05），其余各組差異不顯著（P＞0.05）；Ⅲ組回腸、盲腸和結(jié)腸中大腸桿菌數(shù)量顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組（P＜0.05），其余各組差異不顯著（P＞0.05）。

引起斷奶仔豬腹瀉的原因如下：飼養(yǎng)環(huán)境被大腸桿菌和輪狀病毒污染；輪狀病毒損壞了腸上皮，使?fàn)I養(yǎng)吸收受阻；斷乳后，仔豬失去了母源抗體的保護(hù)；斷奶 應(yīng)激，造成大腸桿菌和輪狀病毒生長(zhǎng)繁殖，使腸上皮損傷進(jìn)一步惡化；飼糧由液體變?yōu)楣腆w，使仔豬食欲減退，輪狀病毒感染就越厲害，導(dǎo)致腹瀉持續(xù)時(shí)間越久。因此，采取措施來(lái)阻止或限制輪狀病毒或大腸桿菌的感染就十分重要。

本試驗(yàn)可明顯看出，隨著仔豬日齡的增加，飼喂發(fā)酵飼料的仔豬抵抗腹瀉的能力顯著高于不飼喂發(fā)酵飼料的的仔豬。發(fā)酵飼料中的益生菌通過(guò)在黏膜表面定植，與其發(fā)生相互作用，可以有效刺激免疫反應(yīng)，把病原菌從腸道上排斥出去。很多研究表明，當(dāng)有益微生物進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，可以影響動(dòng)物的免疫功能，增強(qiáng)自身免疫力，增加腸道黏膜對(duì)外界的抵抗力。

哺乳期間的仔豬能分泌充足的胰脂酶、乳糖酶和蛋白酶。21日齡前胰淀粉酶分泌量較少，所以對(duì)淀粉的消化能力很差。盡管乳糖酶在仔豬出生后 0～14 日齡 活性很高，但麥芽糖酶和蔗糖酶分泌量少而且活性很低。斷奶仔豬的酶活性均顯著下降，分解疼痛的能力也大大降低，致使仔豬產(chǎn)生乳酸及分解各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力下降。很多試驗(yàn)都表明，豬采食含有發(fā)酵菌液的飼料后，腸道中的乳酸含量升高，有效的降低胃腸內(nèi)的 pH 和大腸菌群數(shù)量，提高了抗菌能力，同時(shí)提高飼料消化率和動(dòng)物對(duì)養(yǎng)分的吸收能力。

在本試驗(yàn)中，由于發(fā)酵飼料中含有乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌，枯草芽孢桿菌可與腸道內(nèi)的有害菌群爭(zhēng)奪氧氣，抑制其生長(zhǎng)繁殖，而乳酸桿菌自身也可以產(chǎn)生一些消化酶，如蔗糖酶、乳糖酶和肽酶等，分解食物中的糖分，產(chǎn)生大量的乙酸和乳酸， 使腸內(nèi)pH和Eh下降，腸道處于酸性環(huán)境，對(duì)病原菌等有拮抗作用。乳酸能調(diào)節(jié)腸道pH，以激活胃蛋白酶，促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，提高鐵、鈣、磷的利用率，促進(jìn)維生素 D 和鐵的吸收，幫助食物的消化、吸收，減輕脹氣和促進(jìn)肝臟功能等。

仔豬腸道微生物區(qū)系隨宿主日齡增加形成了一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的微生態(tài)系統(tǒng)，對(duì)宿主的生長(zhǎng)起著重要作用。腸道中微生態(tài)系優(yōu)勢(shì)種群為厭氧菌占99%以上，而需 氧菌和兼性厭氧菌只占有1%。當(dāng)畜禽下痢的時(shí)候，優(yōu)勢(shì)菌群發(fā)生了更替，即專型厭氧菌明顯減少，需氧菌明顯增多，微生態(tài)失去平衡。當(dāng)給腹瀉仔豬口服有益菌制劑后，腸內(nèi)需氧菌與厭氧菌之間由下痢時(shí)的微生態(tài)失調(diào)逐漸恢復(fù)到正常的微生態(tài)狀態(tài)，即優(yōu)勢(shì)菌群平衡。Canibe等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵菌液飼料組較不發(fā)酵組能明顯降低胃腸道的有害細(xì)菌數(shù)量，提高了日糧的適口性，增加了采食量。Tran等的研究表明，發(fā)酵飼料能有效的增加胃腸道中有機(jī)酸的濃度，減少胃中的大腸桿菌的數(shù)量，可以改善腸道的菌群，提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。Canibe等研究發(fā)現(xiàn)，添加植物乳酸菌的飼料可以影響胃腸道的微生物，降低胃的酸度和減少大腸桿菌的數(shù)量。以上這些實(shí)例都說(shuō)明了發(fā)酵飼料的優(yōu)越性。

在本試驗(yàn)中，腸道中乳酸桿菌的數(shù)量顯著高于其他兩組，說(shuō)明在腸道原有菌群的基礎(chǔ)上，添加的乳酸菌在腸道定殖大量繁殖，芽孢桿菌的數(shù)量也增長(zhǎng)的趨勢(shì)，大腸桿菌的數(shù)量也明顯降低。