紫花苜蓿青貯為主的混合發(fā)酵飼料研究
摘 要：以分別晾曬4h、8h、12h和24h后調(diào)制的紫花苜蓿青貯為主要原料，添加8%豆粕和22%玉米粉后進行二次青貯，室溫貯藏45d后取樣分析。結(jié)果表明：添加豆粕和玉米粉能顯著改善晾曬4h、8h后青貯的紫花苜蓿青貯飼料再次青貯的發(fā)酵品質(zhì)（P<0.05），而對于晾曬12h、24h后青貯的紫花苜蓿青貯飼料，添加組的發(fā)酵品質(zhì)普遍較差；第二次青貯后，氨態(tài)氮占總氮的百分含量隨著晾曬時間增加而顯著降低（P<0.05）。晾曬4h、8h后青貯的紫花苜蓿青貯飼料再添加玉米粉和豆粕調(diào)制混合發(fā)酵飼料是可行的，其中以晾曬4h后青貯的紫花苜蓿青貯飼料為原料效果最佳。
關(guān)鍵詞：苜蓿青貯；發(fā)酵品質(zhì)；玉米粉；豆粕
紫花苜蓿（Medicago Sativa L. ）是世界公認的優(yōu)秀豆科牧草[1]，青貯后的紫花苜蓿適口性好、消化率高，優(yōu)質(zhì)的苜蓿青貯粗蛋白質(zhì)含量在18%以上[2]，還是維生素、特別是胡蘿卜素與某些未知因子的重要來源[3]。但單獨的苜蓿青貯不能滿足高產(chǎn)奶牛的能量需要，而添加玉米粉和豆粕后密封保存，在保證蛋白水平的基礎(chǔ)上提高能量水平，可滿足高產(chǎn)奶牛對能量和蛋白的需求。本研究不以苜蓿鮮草而以青貯后的苜蓿為原料，添加玉米粉、豆粕后對其再次青貯，為獲得以苜蓿為主的優(yōu)質(zhì)混合發(fā)酵飼料提供依據(jù)。
1· 材料和方法
1.1 原料
采自河北黃驊，分別晾曬4h、8h、12h、24h然后大窖青貯120d的紫花苜蓿青貯飼料；玉米粉，豆粕。
1.2 處理
將晾曬4h、8h、12h和24h然后大窖青貯120d的紫花苜蓿青貯飼料做以下處理：（1）無添加組（N）：不添加玉米粉和豆粕；（2）添加組（S+C）：紫花苜蓿青貯飼料70%、豆粕8%、玉米粉22%均勻混合，每個處理3個重復，每袋300g左右，抽真空后封口，室溫條件下貯藏45d后分析營養(yǎng)成分和發(fā)酵品質(zhì)。
1.3 分析項目
開啟青貯窖后隨機取樣，測定苜蓿青貯的干物質(zhì)（DM）和粗蛋白（CP）含量[4]，采用蒽酮-硫酸法測定可溶性碳水化合物含量[5]。
pH測定：取青貯飼料鮮樣20g，加入180mL蒸餾水，攪拌均勻，用組織搗碎機攪碎1min，先后用4層紗布和定性濾紙過濾，濾出草渣得到浸出液，再用pH測定儀測青貯飼料浸出液的pH值[6]。
有機酸測定：使用SHIMADZE-10A型高效液相色譜儀分析乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）和丁酸（BA）含量；色譜柱為Shodex Rspak KC-811 S-DVB gelColumn 30×8mm，檢測器為SPDM10AVP，流動相為3mmoL/L高氯酸，流速1mL/min，柱溫50℃，檢測波長210nm，進樣量5μL[7]。
氨態(tài)氮（NH3-N）的測定：采用苯酚-次氯酸鈉比色法[8]。
V-Score評分：V-Score評分體系是以氨態(tài)氮和揮發(fā)性脂肪酸(VFA)為評定指標而進行的青貯品質(zhì)評價方法[9]，滿分為100分，各指標不同含量分配的分數(shù)不同。根據(jù)評分將青貯飼料的品質(zhì)分為良好（>80分）、尚可（60～80分）、不良（<60分）3個級別。
1.4 數(shù)據(jù)分析
用SAS9.0軟件中的GLM程序?qū)?shù)據(jù)進行方差分析和多重比較。
2· 結(jié)果與分析
2.1 紫花苜蓿青貯的發(fā)酵品質(zhì)
表1所示為混合發(fā)酵飼料制作前紫花苜蓿青貯的發(fā)酵品質(zhì)。可見4h和8h晾曬處理組pH值顯著低于12h和24h晾曬處理組（P<0.05），乳酸含量顯著高于12h和24h晾曬處理組（P<0.05），乙酸含量隨著晾曬時間的延長而降低；不同晾曬時間對紫花苜蓿青貯飼料的乳酸/乙酸比值有顯著影響，隨著晾曬時間的增加而顯著升高（P<0.05）。表2是紫花苜蓿青貯飼料的V-Score評分結(jié)果，可見晾曬8h、12h、24h后再調(diào)制的苜蓿青貯品質(zhì)較晾曬4h好。
2.2 混合發(fā)酵飼料的發(fā)酵品質(zhì)
由表3 可以看出， 除2 4h 晾曬組外， 添加豆粕與玉米粉后青貯飼料中氨態(tài)氮占總氮比例顯著降低（P<0.05）；與12h組和24h組相比，4h組和8h組添加玉米粉和豆粕能顯著提高混合發(fā)酵飼料中乳酸的含量，乳酸/乙酸比值顯著升高（P<0.05），并使第二次青貯的pH值降到4.2以下（P<0.05）。添加玉米粉和豆粕對混合發(fā)酵飼料的乙酸含量無顯著影響，除8h晾曬組外，其余各組添加玉米粉和豆粕后丁酸含量均有所降低。除8 h組外，其余各組在添加玉米粉和豆粕后可溶性糖含量顯著提高（P<0.05）；12h和24h晾曬組中，添加玉米粉和豆粕后粗蛋白（CP）含量顯著提高（P<0.05）。
3· 討論
苜蓿青貯飼料的pH值均較高，這可能是由于紫花苜蓿的含糖量低，緩沖度高[10]，附著的乳酸菌數(shù)量又少，很難調(diào)制成優(yōu)質(zhì)青貯料。據(jù)Mrash等[11]、Dawson等[12]報道，晾曬時間的延長限制了青貯發(fā)酵過程，導致發(fā)酵產(chǎn)物減少，青貯料pH值隨晾曬時間增加而升高。本試驗所用苜蓿青貯飼料中除4h晾曬組外，其余各組丁酸含量均較低，這可能是因為青貯料中水分下降抑制了丁酸菌發(fā)酵所致，有研究認為含水量降到50％時，就能阻止酪酸發(fā)酵[2]。
4h和8h晾曬組中無添加處理的乳酸、乙酸含量低于紫花苜蓿青貯飼料原料，這可能是開窖后到第二次青貯前乳酸、乙酸揮發(fā)的緣故。晾曬4h和8h的紫花苜蓿青貯料，添加玉米粉和豆粕能顯著提高苜蓿第二次青貯的發(fā)酵品質(zhì)，推測是因為玉米粉為乳酸菌發(fā)酵提供了充足的底物。對于晾曬12h和24h后制作的苜蓿青貯，添加玉米粉和豆粕二次青貯后，乳酸、乙酸、丁酸含量降低，pH值升高，這可能是因為苜蓿青貯料水分含量過低使青貯反應(yīng)介質(zhì)中水的活性降低，導致苜蓿本身含有的產(chǎn)酸菌發(fā)生生理干燥抑制了青貯過程中酸度的積累，從而不利于青貯發(fā)酵[13]。McEniry[14]研究發(fā)現(xiàn)，未晾曬直接調(diào)制的青貯飼料中梭菌數(shù)量極顯著高于晾曬24h和48h后青貯的處理組（P<0.01），丁酸含量也極顯著高于后二者（P<0.01）。本試驗中除8h晾曬組添加玉米粉和豆粕后丁酸含量稍有升高外，其他添加組丁酸含量均降低，可能是因為添加玉米粉和豆粕進一步降低了原料的含水量，從而抑制了梭菌的活動。本試驗與McEniry等[15]研究相似，氨態(tài)氮占總氮的百分比隨晾曬時間的增加而顯著降低，表明苜蓿青貯料含水量的降低能在一定程度上抑制蛋白質(zhì)的分解；添加玉米粉和豆粕后氨態(tài)氮占總氮比例顯著降低，與郭玉琴等[16]研究一致，這也是添加組粗蛋白含量顯著增加的原因之一。
本研究在苜蓿青貯料中添加玉米粉和豆粕進行二次青貯，混合青貯料的蛋白和可溶性糖含量均不同程度提升，說明添加玉米粉和豆粕后調(diào)制混合發(fā)酵飼料不僅使能量水平提高，粗蛋白含量也有所提高。以晾曬4h后青貯的苜蓿青貯為原料制作的混合發(fā)酵飼料，其pH值、丁酸含量都明顯低于其他組，而乳酸、乙酸含量明顯高于其他組，這表明高水分條件下苜蓿青貯料添加玉米粉和豆粕調(diào)制混合發(fā)酵飼料是完全可行的，可以獲得優(yōu)質(zhì)的混合發(fā)酵飼料，其他低水分條件下，苜蓿再次青貯的發(fā)酵品質(zhì)均好于第一次青貯，為苜蓿青貯和商業(yè)化運輸提供了理論依據(jù)和技術(shù)支持。
4· 小結(jié)
苜蓿青貯料可以用來調(diào)制混合發(fā)酵飼料；以晾曬4h和8h后青貯的苜蓿青貯料為原料，添加玉米粉和豆粕調(diào)制混合發(fā)酵飼料效果較好，不僅提高了飼料的能量水平還保證了飼料的粗蛋白含量，其中以晾曬4h后青貯的苜蓿青貯料為原料調(diào)制混合發(fā)酵飼料效果最佳。
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本品是一種以高濃度乳酸菌（300億/g）為主要原料加強型的專業(yè)青貯飼料發(fā)酵劑產(chǎn)品，適用于所有規(guī)模反芻動物養(yǎng)殖場使用，培養(yǎng)后可進行噴霧添加到青貯、微貯飼料固料中。與自然發(fā)酵或市場上一般EM菌比較，是為數(shù)不多的添加青貯飼料專業(yè)菌種：產(chǎn)丙酸丙酸桿菌、布氏乳桿菌、副干酪乳桿菌等的產(chǎn)品，具有：
1.發(fā)酵速度快，青貯發(fā)酵不易失敗。
2.增加分解秸稈纖維能力，縮短發(fā)酵時間，提高消化吸收率；
3.增加特殊酶和增香甜菌種，能夠提高青貯料香甜度和營養(yǎng)；
4.具有抑制青貯料持續(xù)產(chǎn)酸生態(tài)菌群設(shè)計，適口性佳；
5.使用成本低廉，1包發(fā)酵2-3噸青貯秸稈飼料；
6.使用本產(chǎn)品制作的青貯飼料和微貯飼料飼喂動物后，養(yǎng)殖場臭味、氨氣味等大幅度降低；
7.動物排泄糞便中會殘留大量益生菌，糞便能夠自然加快發(fā)酵速度，形成良好益生環(huán)境。
【產(chǎn)品簡介】
大家都知道EM菌建議進行青貯飼料，比自然發(fā)酵的飼料速度快，但水劑EM菌產(chǎn)品因無法長時間保證復合酶制劑和乳酸菌等的活性而無法添加在產(chǎn)品中，因此發(fā)酵青貯、微貯飼料存在分解秸稈的纖維慢、存在持續(xù)產(chǎn)酸后期影響適口性等問題。
本產(chǎn)品創(chuàng)新地采用固體EM菌設(shè)計，更方便運輸。未使用前菌種處于休眠狀態(tài)，在水中激活后快速對數(shù)繁殖（30℃環(huán)境下24小時后每毫升含活菌總數(shù)≥100億cfu）產(chǎn)生發(fā)酵功能，因為具有快速分解秸稈的纖維能力發(fā)酵速度極快，發(fā)酵出來的青貯飼料不僅更香醇、營養(yǎng)更豐富，且在密封狀態(tài)下可以保存1年以上不變質(zhì)。
牛羊等草食動物對發(fā)酵出來的青貯飼料非常喜吃，由于發(fā)酵的料非常香醇，還可以直接飼喂母豬、雞、鴨、鵝等，實踐證明都非常愛吃和很好的飼養(yǎng)效果，節(jié)約很多的飼料。動物食用后由于糞便中還存在大量的益生菌等，養(yǎng)殖場的臭味和氨氣等大大降低，糞便能夠自然快速發(fā)酵，形成生態(tài)養(yǎng)殖。
【用法用量】
將本產(chǎn)品1包（200克）與200克以上紅糖（數(shù)量越多效果越好，白糖、葡萄糖）溶于10-50公斤的水中（根據(jù)秸稈的含水量適當增減，低溫季節(jié)建議用35℃左右的溫水），24小時以上再用水稀釋或者直接噴入2-3噸秸稈青貯料中（可以一邊填料一邊噴入），將秸稈填入發(fā)酵池或容器中，一定要壓實并采用至少雙層膜密封頂部和采料的側(cè)面，保證密封性。
一般24小時后就會明顯升溫，3天左右產(chǎn)生高溫，并有香醇的發(fā)酵味溢出，一般發(fā)酵20天以上才開封使用 ，如果用于喂豬、雞、鴨、鵝等建議發(fā)酵30天以上才使用。每次取用青貯料后，都要再次密封。
由于本品中加入了特別的復合酶制劑，也可以對秸稈不需要鍘切，整條進行青貯發(fā)酵，只要壓實密封即可。發(fā)酵時間適當延長，達到株桿糜爛成微微泥狀即可使用。
運用加強型EM菌青貯飼料發(fā)酵劑不鍘草青貯飼料現(xiàn)場
用于喂豬、雞、鴨、鵝等的青貯飼料，開啟后要透氣一小時以上，以不超過30%的比例與其它飼料混合后飼喂 。
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