發(fā)酵飼料對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性及免疫功能的影響

2021-02-01 09:48:23 點(diǎn)擊：

摘要：本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加不同水平的發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性及免疫功能的影響。選用 35 周齡龍巖山麻鴨 750 只，隨機(jī)分為 5 組，每組 6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù) 25 只鴨。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ) 飼糧中添加 2%、4% 的發(fā)酵混合飼料和 2%、4% 的發(fā)酵酒糟。試驗(yàn)期 3 個(gè)月。結(jié)果表明：1、與對照組相比，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了蛋鴨的日產(chǎn)蛋重 (P ＜ 0.05) ，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著降低了蛋鴨的料蛋比 (P ＜ 0.05) ，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了鴨蛋中蛋清重和蛋黃顏色 (P ＜ 0.05) ，飼糧添加 4% 發(fā)酵混合飼料和 4% 發(fā)酵酒糟顯著降低了蛋鴨肌胃和腺胃 pH(P ＜ 0.05)，飼糧添加 4% 發(fā)酵混合飼料顯著提高了蛋鴨空腸脂肪酶和糜蛋白酶活性 (P ＜ 0.05)，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵酒糟顯著提高了蛋鴨空腸糜蛋白酶和胰蛋白酶活性 (P ＜ 0.05)，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了蛋鴨空腸黏蛋白；2、分泌型免疫球蛋白 A (SIgA) 的 m Ｒ NA 相對表達(dá)量以及 SIgA含量 (P ＜ 0.05) 。綜上所述，發(fā)酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性和免疫功能優(yōu)于發(fā)酵混合飼料，且以 4% 的添加水平效果更好。

關(guān)鍵詞 : 發(fā)酵飼料；蛋鴨；產(chǎn)蛋性能；消化酶活性；腸道免疫

近年來，抗生素的藥物殘留問題及其危害日益突出，禁用抗生素已是大勢所趨。因此，研發(fā)飼用抗生素替代品成為動(dòng)物營養(yǎng)領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)。發(fā)酵飼料是利用益生菌對飼料進(jìn)行發(fā)酵得到的一種新型微生物類飼料，其在生產(chǎn)過程中微生物發(fā) 酵可以產(chǎn)生大量有益于動(dòng)物健康的代謝產(chǎn)物，具有提高飼料利用率、改善腸道健康等特點(diǎn)。因此，發(fā)酵飼料可以在一定程度上減少養(yǎng)殖過程中飼用抗生素的使用，從而降低養(yǎng)殖成本。目前，關(guān)于蛋鴨養(yǎng)殖中使用發(fā)酵飼料的信息很有限，研究發(fā)酵飼料在蛋鴨飼糧中的合理應(yīng)用技術(shù)對蛋鴨健康養(yǎng)殖具有重要意義。

近年來研究顯示，在家禽生產(chǎn)中使用發(fā)酵飼料可維持家禽消化道微生態(tài)平衡、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、提高生長性能。崔衛(wèi)濤等報(bào)道，飼糧添加 4% 發(fā)酵棕櫚粕可提高蛋雞產(chǎn)蛋性能、雞蛋哈氏單位和蛋黃色澤，改善蛋品質(zhì)。Feng 等在飼糧中添加發(fā)酵豆粕顯著提高了 1 ～ 21 日齡肉仔雞小腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、脂肪酶和糜蛋白酶活性。蛋鴨養(yǎng)殖模式粗放，由病毒、細(xì)菌感染、惡劣飼養(yǎng)環(huán)境等導(dǎo)致的腸道性疾病非常普遍，造成蛋鴨產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)下降，機(jī)體抗氧化和免疫機(jī)能低下。目前，有關(guān)發(fā) 酵飼料在蛋鴨生產(chǎn)中的應(yīng)用報(bào)道較少，不同底物來源發(fā)酵飼料對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性及免疫功能的影響未見報(bào)道。因此，本試驗(yàn)擬采用復(fù)合益生菌對以玉米、豆粕、麩皮為底物和以酒糟為底物分別發(fā)酵制備發(fā)酵飼料，研究不同發(fā)酵飼料對產(chǎn)蛋高峰期蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性及免疫功能的影響，旨在為發(fā)酵飼料在蛋鴨生產(chǎn)中合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所原花都蛋鴨實(shí)驗(yàn) 基地進(jìn)行，試驗(yàn)選用 35 周齡的福建龍巖山麻母鴨 750 只，隨機(jī) 分為 5 個(gè)組，每組 6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù) 25 只鴨。試驗(yàn)鴨地面平養(yǎng) ( 水域面積∶陸地面積為 1:3) 。蛋鴨產(chǎn)蛋率在 80% 以上時(shí)開始正式試驗(yàn)，試驗(yàn)期間自由采食和飲水，每日光照 16h，試驗(yàn) 期為 3 個(gè)月。

1.2 試驗(yàn)飼糧

試驗(yàn)采用玉米－豆粕型飼糧。實(shí)測玉米、小麥麩和豆粕的粗蛋白質(zhì)含量，其余營養(yǎng)參數(shù)參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價(jià)值表( 2017 年第 28 版 )》配制飼糧，試驗(yàn)飼糧的營養(yǎng)水平參照本課題組研究結(jié)果確定，各組的營養(yǎng)水平保持一致，試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。對照組飼喂不含抗生素的基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加 2%、4% 的發(fā)酵混合飼料和 2%、4% 的發(fā) 酵酒糟。本試驗(yàn)所用的發(fā)酵飼料由新希望六和股份有限公司廣東新區(qū)提供。其中，發(fā)酵菌液由乳酸菌、枯草芽孢桿菌和酵母菌組成，活菌數(shù)分別為 1×107 、1×108 和 3×107 CFU/g。發(fā)酵混合飼料是以玉米、豆粕、麩皮為底物，按質(zhì)量比 20:20:60 比例混合后，以 1000kg 底物接種 500kg 發(fā)酵菌液厭氧發(fā)酵 7d 制備而成，烘干后其水分含量為 10%，粗蛋白質(zhì)含量為 13%，pH為 4.2；發(fā)酵酒糟是以酒糟為底物，以 1000kg 底物接種 500kg 發(fā)酵菌液厭氧發(fā)酵 7d 制備而成，烘干后其水分為 10%，粗粗蛋白質(zhì)含量為 21%，pH 為 4.5。

1.3 樣品的采集與制備

試驗(yàn)鴨飼養(yǎng) 3個(gè)月后，每重復(fù)選接近平均體重試驗(yàn)鴨 2只，稱活體重后，試驗(yàn)鴨頸部放血致死，剖開腹腔，取出內(nèi)臟，分離出肌胃、腺胃、十二指腸、空腸和回腸，用于測定 pH ；另外，用手術(shù)刀分離 10cm 空腸中段，取空腸內(nèi)容物。然后用預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液 (PBS) 清洗后分成 2 段，一段空腸置于冰板上用載玻片快速刮取空腸黏膜，黏膜樣和空腸段分別裝入凍存管，于液氮速凍，-80℃保存?zhèn)溆谩Ｔ诋a(chǎn)蛋高峰期每個(gè)月末，從每個(gè)重復(fù)欄選取 4 枚未破損蛋 ( 接近平均蛋重 )，共計(jì) 120 枚，做好標(biāo) 記，用于測定蛋品質(zhì)指標(biāo)。

1.4 檢測指標(biāo)與方法

1.4.1 產(chǎn)蛋性能

試驗(yàn)期間，所有欄試驗(yàn)鴨每天的給料量都保持一致，每天準(zhǔn)確記錄剩料量。以重復(fù)為單位，準(zhǔn)確記錄試驗(yàn)鴨每天的蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)量、破蛋、畸形蛋數(shù)量和重量，統(tǒng)計(jì)產(chǎn)蛋率、平均蛋重、日產(chǎn)蛋重、料蛋比、破蛋率、畸形蛋率。

1.4.2 蛋成分和蛋品質(zhì)

蛋殼厚度用數(shù)顯千分尺 ( MODEL-1061) 測定蛋殼鈍端、中部和銳端蛋殼厚度，取其平均值表示；蛋形指數(shù)采用游標(biāo)卡尺 ( 滬制01120028) 量出其縱徑和橫徑后計(jì)算比值表示; 蛋殼強(qiáng)度、哈氏單位、蛋重和蛋黃顏色采用蛋殼強(qiáng)度儀 (EFR-01，以色列 ) 和全自動(dòng)蛋品分析儀 (ORKA，北京天翔飛域儀器設(shè)備有限公司 ) 測定 ; 蛋黃重采用精密電子分析天平 (AL104) 測定 ; 蛋殼重為含有蛋殼膜的蛋殼在烘箱 105℃烘干冷卻后稱重 ; 蛋清重則通過蛋重減去蛋黃重和蛋殼重后計(jì)算得出。測定在鴨蛋采集后 48 h 內(nèi)完成，最后取各批次的蛋品質(zhì)指標(biāo)的平均值表示。

1.4.3 胃腸道 pH

屠宰結(jié)束分離出胃腸組織后，立即用 pH90 型直插式 pH 計(jì) 測定肌胃、腺胃、十二指腸、空腸和回腸內(nèi)容物 pH，每個(gè)組織樣測定 3 次，取平均值。 1.4.4 空腸消化酶活性和分泌型免疫球蛋白 A(SIgA) 含量

分別取空腸內(nèi)容物和空腸黏膜 0.3g，按質(zhì)量比 1:9 加勻漿介質(zhì)，勻漿，4℃下 4000r/min 離心 10min，取上清液，分別用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定空腸內(nèi)容物中淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶活性和 SIgA 含量。

1.4.5 腸道免疫相關(guān)基因 mRNA 相對表達(dá)量的測定

空腸總 RNA 的提取采用 TRIzol 試劑 (Invitro-gen，美國 ) 提取，提取的總 RNA 用 ND-1000 紫外分光光度計(jì) (Thermo Fisher，美國 ) 在 OD260/OD280 下檢測 RNA 的濃度和純度。cDNA 的合成采用 cDNA 合成試劑盒 (TaKaRa，日本 ) 兩步法在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀 (CFX 96，BIO-RAD，美國 ) 進(jìn)行。第 1 步基因組 DNA 去除反應(yīng)，反應(yīng)體系為 10μL，反應(yīng)參數(shù)為 42℃ 2min；第 2 步反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，反應(yīng)體系為 20μL，反應(yīng)參數(shù)為 37℃ 15 min， 85℃ 5s，4℃保存。反應(yīng)結(jié)束后樣品轉(zhuǎn)移至 -80℃凍存待用。

實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 反應(yīng)程序 : 第 1 步預(yù)變性，95℃ 30 s；第 2 步 PCR 擴(kuò)增，95℃ 5s、退火溫度 30s，40 個(gè)循環(huán)。所有引物依據(jù) iTaqTM Universal SYBER Green (TaKaRa，日本 ) 試劑盒要求，參照 GenBank 上已發(fā)布序列，采用 Primer Premier 5.0 設(shè)計(jì) ( 跨內(nèi)含子 ) 或參考相關(guān)文獻(xiàn)，引物由上海生工生物工程公司廣州分公司合成，引物序列見表 2。

參照 Livak 等的方法用 2-ΔΔCT 法定量目標(biāo)基因的相對表達(dá)量，以 β- 肌動(dòng)蛋白 (β-actin) 作為內(nèi)參基因進(jìn)行校準(zhǔn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SAS V8.1 軟件進(jìn)行單因素方差分析 ( one-way ANOVA) ，并采用 Duncan 氏法進(jìn)行多重比較。結(jié)果用平均值與均值標(biāo)準(zhǔn)誤 (SEM) 表示，統(tǒng)計(jì)顯著性水平為P ＜ 0.05。 2 結(jié)果

2.1 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋性能的影響

如表 3 所示，與對照組相比，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了蛋鴨的日產(chǎn)蛋重 (P ＜ 0.05) ，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著降低了料蛋比 (P ＜ 0.05) 。飼糧添加發(fā)酵混合飼料和發(fā) 酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋率、平均蛋重、破蛋率以及畸形蛋率均無顯著影響 (P ＞ 0.05) 。

2.2 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨蛋成分和蛋品質(zhì)的影響

如表 4 所示，與對照組相比，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了鴨蛋中蛋清重和蛋黃顏色 (P ＜ 0.05)。飼糧添加發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、蛋形指數(shù)、蛋黃重、蛋殼重均無顯著影響 (P ＞ 0.05) 。

2.3 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨胃腸道的影響

pH 和消化酶活性的影響如表 5 所示，與對照組相比，飼糧添加 4% 發(fā)酵混合飼料和 4% 發(fā)酵酒糟顯著降低了蛋鴨肌胃和腺胃 pH(P ＜ 0.05)。飼糧添加發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨十二指腸、空腸和回腸 pH 均無顯著影響 (P ＞ 0.05) 。

如表 6 所示，與對照組相比，飼糧添加 4% 發(fā)酵混合飼料顯著提高了蛋鴨空腸脂肪酶和糜蛋白酶活性 (P ＜ 0.05)，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵酒糟顯著提高了蛋鴨空腸糜蛋白酶、胰蛋白酶活性 (P ＜ 0.05) 。

2.4 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨空腸免疫細(xì)胞因子 mRNA 相對表達(dá)量和 SIgA 含量的影響

如表 7 所示，與對照組相比，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟顯著升高了蛋鴨空腸黏蛋白 2(MUC2) 、SIgA 的 mRNA 相對表達(dá)量以及 SIgA 含量 (P ＜ 0.05) 。飼糧添加發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對空腸白細(xì)胞介素 -1β(IL-1β)、白細(xì)胞介素 -6(IL-6) 、白細(xì)胞介素 -10(IL-10) 、干擾素 -α(IFN-α) 的 mRNA 相對表達(dá)量均無顯著影響 ( P ＞ 0.05) 。

3 討論

發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋性能的影響發(fā)酵飼料主要是以微生物為生物飼料發(fā)酵菌種，將飼料蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為微生物菌體蛋白、生物活性小肽、氨基酸、微生物活性益生菌為一體的生物發(fā)酵飼料。它可以產(chǎn)生大量有機(jī)酸、酶等代謝物，提高飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，降低抗?fàn)I養(yǎng)因子，改善飼料品質(zhì) ; 同時(shí)增強(qiáng)機(jī)體免疫力和抵抗力。近年來，玉米、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酒糟等飼料資源發(fā)酵后飼用效果的研究報(bào)道不少，發(fā)酵飼料在配合飼料中添加比例一般為 2% ～ 50%。在生產(chǎn)性能方面，總體表現(xiàn)為產(chǎn)蛋率升高，料蛋比降低，每千克肉、蛋的飼糧成本降低，養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益增加。崔衛(wèi)濤等在蛋雞飼糧中飼喂添加 4% 發(fā)酵棕櫚粕可以提高日產(chǎn)蛋重，降低料蛋比。 Engberg 等以濕發(fā)酵飼料與水的混合比例按 1．0∶ ( 1.2～ 1.4) 飼喂蛋雞可改善蛋重和飼料轉(zhuǎn)化率，但對產(chǎn)蛋率和日產(chǎn)蛋重?zé)o 顯著影響。Okrathok 等研究報(bào)道，蛋雞飼糧添加 24% 發(fā)酵木薯對蛋雞采食量、產(chǎn)蛋率和蛋重?zé)o負(fù)面影響。周建民等試驗(yàn)表明，飼糧添加 0.9% ～ 1.2% 酒糟酵母培養(yǎng)物能通過提高肉仔雞血清抗氧化能力，改善空腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)，從而改善生長性能。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧發(fā)酵酒糟添加水平達(dá)到 4% 時(shí)可改善 35 周齡龍巖山麻鴨產(chǎn)蛋性能，明顯提高麻鴨的日產(chǎn)蛋重，降低料蛋比，這與其他相關(guān)研究報(bào)道基本一致。豆粕發(fā)酵可降低豆粕中的β伴大豆球蛋白、大豆球蛋白、植酸磷等抗?fàn)I養(yǎng)因子。與玉米、豆粕和麩皮為底物的發(fā)酵混合飼料相比，以酒糟為底物的發(fā)酵酒糟富含蛋白質(zhì)、氨基酸、核苷酸、B 族維生素、礦物質(zhì)和微量元素等營養(yǎng)素及多肽、寡糖、有機(jī)酸、消化酶和未知生長因子等多種益生物質(zhì)。其促生長作用可能與其發(fā)酵后降低粗纖維含量、提高飼糧適口性以及富含的各種營養(yǎng)素和益生成分的作用密不可分。蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素等營養(yǎng)物質(zhì)可保障動(dòng)物自身正常生長。小肽、寡糖、有機(jī)酸和消化酶等可改善腸道內(nèi) 環(huán)境，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。同時(shí)，未知生長因子在促生長中可能存在協(xié)同與轉(zhuǎn)化作用。

3.2 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨蛋品質(zhì)的影響

本試驗(yàn)中，飼糧添加 4%發(fā)酵酒糟顯著提高了蛋鴨蛋黃顏色，但對蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度等無顯著影響。有研究報(bào)道，發(fā)酵飼料中富含乳酸桿菌和雙歧桿菌，可以影響宿主代謝，特別是肝臟和腸道組織；它可以提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶等抗氧化酶活性，降低機(jī)體氧化應(yīng)激，從而提高畜禽產(chǎn)品品質(zhì)。發(fā)酵酒糟富含氨基酸、維生素、輔酶以及微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)，具有抗氧化作用，能通過生理途徑進(jìn)入禽蛋中，改善禽蛋品質(zhì)。與發(fā)酵豆粕和發(fā)酵麩皮相比，發(fā)酵酒糟富含葉黃素，可調(diào)節(jié)禽蛋蛋黃顏色。王少琨等研究表明，飼糧添加2%～8% 發(fā)酵酒糟可提高 72 周齡海蘭褐蛋雞蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位。吳俊鋒等研究顯示，飼糧添加 2.5% 發(fā)酵豆粕可提高蛋黃顏色。Lei 等研究報(bào)道，蛋雞在產(chǎn)蛋高峰期飼糧添加地衣芽孢桿菌顯著增加了蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度、哈氏單位和蛋黃顏色。 Engberg 等研究報(bào)道，飼喂?jié)癜l(fā)酵飼料顯著提高了雞蛋蛋殼重和蛋殼強(qiáng)度。以上研究表明，飼糧添加適宜比例的發(fā)酵飼料可以改善禽蛋品質(zhì)。以酒糟為底物的發(fā)酵酒糟在改善蛋黃顏色和哈氏單位方面優(yōu)于以玉米、豆粕和麩皮為底物的發(fā)酵混合飼料。本試驗(yàn)中，發(fā)酵混合飼料并未改善蛋黃顏色，可能與底物中玉米和豆粕含量較低有關(guān)

3.3 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨胃腸道 pH 和消化酶活性的影響

畜禽消化道酸度是影響其消化環(huán)境的重要因素，也是調(diào)節(jié) 胃腸道內(nèi)環(huán)境酸堿平衡、電解質(zhì)平衡的基礎(chǔ)，適宜的酸度是維持畜禽消化系統(tǒng)正常生理功能的關(guān)鍵。胃內(nèi) pH 降低，可使胃蛋白酶迅速活化，pH提高到 4時(shí)，活化速度緩慢；當(dāng) pH大于 6時(shí)，胃蛋白酶失活。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在蛋鴨飼糧中添加 4% 發(fā)酵混合飼料和 4% 發(fā)酵酒糟均可顯著降低肌胃和腺胃 pH，有利于胃蛋白酶分泌。動(dòng)物消化利用營養(yǎng)物質(zhì)主要通過消化道內(nèi)消化酶的作用，其活性高低直接影響動(dòng)物對飼糧的利用程度。淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶是畜禽消化道內(nèi)主要的 3 種消化酶。Feng 等在飼糧中添加發(fā)酵豆粕替代豆粕顯著提高了 1 ～ 21 日齡肉仔雞小腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、脂肪酶和糜蛋白酶活性，而且在 22 ～ 42 日齡階段蛋白酶活性進(jìn)一步加強(qiáng)。Jin 等在肉仔雞飼糧中添加不同的乳酸菌制劑發(fā)現(xiàn)，乳酸菌顯著提高了 40 日齡肉仔雞小腸中淀粉酶活性。石琳等研究報(bào)道，飼糧添加酵母濃縮物有提高十二指腸內(nèi)容物淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性的趨勢。還有研究表明，益生菌可提高畜禽腸道消化酶活性。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加4%發(fā)酵混合飼料顯著提高了蛋鴨空腸脂肪酶和糜蛋白酶活性，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵酒糟顯著提高了蛋鴨空腸糜蛋白酶、胰蛋白酶活性，與不同動(dòng)物的研究結(jié)果基本一致?？赡艿脑?yàn)?: 酵母菌、乳酸菌和芽孢桿菌的代謝產(chǎn)物中含有消化酶，可以直接給蛋鴨補(bǔ)充的消化酶；也可能改善蛋鴨腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)，促進(jìn)酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌等有益菌的繁殖，進(jìn)而提高腸道內(nèi)消化酶活性。

3.4 發(fā)酵混合飼料和發(fā)酵酒糟對蛋鴨腸道免疫功能的影響

腸黏膜免疫屏障系統(tǒng)主要由腸相關(guān)淋巴組織構(gòu)成，包括黏膜固有層及上皮細(xì)胞層內(nèi)淋巴細(xì)胞、孤立淋巴濾泡、腸系膜淋巴結(jié)、潘氏細(xì)胞等。腸道免疫系統(tǒng)受到刺激后，可以分泌免疫球蛋白、白細(xì)胞介素和干擾素等，通過免疫調(diào)節(jié)維持腸道上皮穩(wěn)態(tài)。SIgA 是腸道外分泌物中的主要免疫球蛋白，亦是黏膜免疫系統(tǒng)中的優(yōu)勢性抗體，它與非特異性免疫蛋白共同作用可阻止微生物黏附于上皮細(xì)胞，阻止損傷的相關(guān)炎癥反應(yīng)，還可以中和微生物毒素和病原微生物，調(diào)控腸道共生菌群，維持不同腸段菌群特異性。MUC2 由腸道杯狀細(xì)胞分泌，是構(gòu)成腸道黏液層的主要成分，發(fā)揮潤滑和拮抗致病菌的侵襲和黏附作用。細(xì) 胞因子具有調(diào)節(jié)白細(xì)胞、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、參與免疫應(yīng)答和組織修復(fù)等生理功能。

關(guān)于發(fā)酵飼料對家禽腸道免疫功能的影響報(bào)道較少，大多數(shù)研究集中在腸道分泌型免疫球蛋白含量等表觀指標(biāo)測定。Gao 等研究發(fā)現(xiàn)，科比肉仔雞飼糧中添加 0.25% ～ 0.50% 釀酒酵母發(fā) 酵物可增加回腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量和盲腸扁桃體 SIgA 含量，降低球蟲感染。劉輝等在飼糧中添加副干酪乳桿菌發(fā)酵飼料能調(diào)節(jié)菌群平衡，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。有研究表明，飼料微生物發(fā)酵產(chǎn)生的短鏈脂肪酸，如丁酸可誘導(dǎo)杯狀細(xì)胞 MUC2 的分泌和 T 細(xì)胞的分化，同時(shí)可抑制核因子 -κB 表達(dá)，進(jìn)而提高動(dòng)物機(jī) 體的免疫功能。發(fā)酵麩皮多糖具有免疫調(diào)節(jié)作用，可以刺激免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，具有一定的抗炎活性。本試驗(yàn)中，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟可提高蛋鴨空腸中 MUC2、SIgA 的 mRNA 相對表達(dá)量和 SIgA 含量，但對其他細(xì)胞因子的分泌無顯著影響，表明適當(dāng)水平的發(fā)酵酒糟可以促進(jìn)蛋鴨腸道黏蛋白和免疫球蛋白的分泌，抵御病原微生物侵襲。這可能是因?yàn)?，酒糟發(fā)酵飼料中的乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌等可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群平衡和刺激腸道組織產(chǎn)生免疫球蛋白，促進(jìn)腸道淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng) 免疫應(yīng)答，提高機(jī)體的免疫力。本試驗(yàn)中，飼糧添加 4% 發(fā)酵酒糟提高了蛋鴨空腸蛋白酶活性，提高了其對蛋白質(zhì)的利用效率，降低了后腸段殘留蛋白質(zhì)的含量。有研究報(bào)道，提高腸道蛋白質(zhì)利用率會(huì)降低后腸道與蛋白質(zhì)分解相關(guān)菌群豐度，降低后腸道微生物發(fā)酵腸道殘余的蛋白質(zhì)產(chǎn)生的吲哚、組胺、硫化氫、糞臭素等有害代謝產(chǎn)物，緩解腸道細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷，同時(shí)降低機(jī) 體免疫反應(yīng)。本研究中，飼糧添加 2% 和 4% 發(fā)酵混合飼料對蛋鴨細(xì)胞因子分泌無顯著影響。這可能是不同方法所獲得麩皮多糖的結(jié)構(gòu)類型、理化性質(zhì)、得率和活性有差異，有待進(jìn)一步研究。綜上所述，本試驗(yàn)條件下，以酒糟為底物的發(fā)酵酒糟在調(diào)節(jié)蛋鴨腸道免疫功能、改善蛋鴨腸道健康方面優(yōu)于以玉米、豆粕和麩皮為底物的發(fā)酵混合飼料。

4 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，發(fā)酵酒糟對蛋鴨產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)、腸道消化酶活性和免疫功能優(yōu)于發(fā)酵混合飼料，且以 4% 的添加水平效果更好。

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