枯草芽孢桿菌、釀酒酵母及其復(fù)合菌發(fā)酵棉粕營(yíng)養(yǎng)成分變化的研究
枯草芽孢桿菌-1為石河子大學(xué)飼料生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室篩選;釀酒酵母(CICC 1001)購(gòu)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心(CICC);棉粕、麩皮、糖蜜均由新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司提供。
LB培養(yǎng)基:胰蛋白胨10g/L,酵母浸出粉5g/L,氯化鈉10g/L;YPD培養(yǎng)基:酵母浸出粉10g/L,葡萄糖20g/L,蛋白胨20g/L。
稱取棉粕84.1g、麩皮9.4g混勻,稱取糖蜜6.5g溶于66mL蒸餾水中,加入底物中,充分混勻后稱取30g于500mL三角瓶中,6層紗布封口,121℃滅菌20 min,冷卻至室溫。試驗(yàn)I組接種3%(3mL)的枯草芽孢桿菌種子液(活菌數(shù)約為1.925×108CFU/mL);試驗(yàn)Ⅱ組接種釀酒酵母種子液(活菌數(shù)約為2.05×107CFU/mL);試驗(yàn)Ⅲ組按3%的比例分別接種枯草芽孢桿菌-l和釀酒酵母種子液于發(fā)酵底物中(枯草芽孢桿菌:酵母菌=1:1)?;靹蚝笥诤銣嘏囵B(yǎng)箱中培養(yǎng),試驗(yàn)I、Ⅱ、Ⅲ組培養(yǎng)溫度分別為37、30、30℃,每12h振蕩一次,發(fā)酵72h,發(fā)酵結(jié)束后將樣品于45℃烘箱中干燥24h。每組9個(gè)重復(fù)。
感官評(píng)定:發(fā)酵72h后,每組隨機(jī)抽取3個(gè)發(fā)酵飼料瓶的飼料進(jìn)行感官評(píng)定。
常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo):測(cè)定發(fā)酵前后樣品CP、干物質(zhì)(DM)、粗灰分(Ash)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、粗脂肪(EE)、鈣(Ca)、磷(P)含量。
酸溶蛋白質(zhì)含量:準(zhǔn)確稱取樣品5.0g(精確至0.001g),溶于15%三氯乙酸(TCA)溶液并稀釋定容至50mL,混勻。將混合物靜置5min,過(guò)濾,去除初濾液,濾液用作儲(chǔ)備液。移取10~25mL濾液,按照粗蛋白質(zhì)測(cè)定的步驟進(jìn)行。
游離氨基酸含量:采用日立L-8900氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定,儀器條件:色譜柱SHISEIDO C18,4.6mm×250mm×5mm,進(jìn)樣量l0μL,柱溫40℃,波長(zhǎng)254 nm,流動(dòng)相:A,0.1mol/L無(wú)水乙酸鈉:乙腈=97:3(V/V),混勻后調(diào)pH至6.5;B,乙腈:水=80:20(V/V)(表1)。樣品前處理:取適量樣品于離心管中,加入0.02 mol/L HCl 10 mL,渦旋1min,超聲10min,避光靜置2h。將上述溶液離心,分取1mL,加入1mL 7%磺基水楊酸,渦旋1min,避光靜置1h。分取500μL,加入250 μL 0.1 mol/L異硫氰酸苯酯乙腈,250μL 1mol/L三乙胺乙腈,衍生1h。加入2mL正己烷,震蕩,靜置。分層后取下層過(guò)膜上機(jī)。
樣品棉籽肽含量參考大豆肽粉(GB/T 22492—2008)的測(cè)定方法,樣品酸溶蛋白質(zhì)含量減去其中游離氨基酸的含量即為棉籽肽含量。
采用SPSS 25.0軟件One-Way ANOVA方法進(jìn)行方差分析,同時(shí)采用LSD法進(jìn)行多重比較。P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
由表3可知,棉粕經(jīng)枯草芽孢桿菌-1、釀酒酵母和復(fù)合菌發(fā)酵后,常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分均有不同程度的變化;I組的DM、CP和Ash含量極顯著高于其他各組(P<0.01);對(duì)照組的EE含量極顯著高于其他各組(P<0.01);Ⅲ組的ADF極顯著低于其他各組(P<0.01),各組之間NDF含量差異不顯著(P>0.05),與對(duì)照組相比,發(fā)酵棉粕組NDF含量分別降低了11.80%、5.23%、1.36%;各發(fā)酵棉粕組的Ca和P含量均有所提高,其中,Ⅲ組Ca和P含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05),而與I和Ⅱ組差異不顯著(P>0.05)。
由表4可知,枯草芽孢桿菌-1發(fā)酵棉粕可降低棉籽粕中絲氨酸含量,同時(shí)提高天冬氨酸、胱氨酸、甘氨酸、精氨酸、蘇氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、組氨酸含量。釀酒酵母和復(fù)合菌發(fā)酵棉籽粕均可降低棉粕中胱氨酸、絲氨酸、酪氨酸和蛋氨酸含量,同時(shí)提高天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、精氨酸、組氨酸含量。復(fù)合菌發(fā)酵棉粕中脯氨酸和丙苯氨酸含量較高。
由表5可知,與對(duì)照組相比,各試驗(yàn)組發(fā)酵棉粕酸溶蛋白質(zhì)含量、棉籽肽含量均極顯著提高(P
由表6可知,對(duì)照組的蛋白分子質(zhì)量較大,分子質(zhì)量>1000u的占23.4l%,l000u以下的占76.59%。而通過(guò)枯草芽孢桿菌-1、釀酒酵母和復(fù)合菌發(fā)酵之后,棉粕中大分子蛋白明顯被降解為小分子蛋白、游離氨基酸和棉籽肽。與對(duì)照組相比,各發(fā)酵試驗(yàn)組1000u以下的棉籽肽峰面積百分比分均有提高,分別為89.41%、77.61%和84.58%。
在發(fā)酵初期,物料黏度小,通過(guò)晃動(dòng)和淺層供應(yīng)氧氣,好氧菌得以快速生長(zhǎng)并產(chǎn)酶,在發(fā)酵后期,物料黏度增大,晃動(dòng)難度加大,發(fā)酵物料間氧氣耗盡,進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵??莶菅挎邨U菌-1在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生CO2,在發(fā)酵后期進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵,最終產(chǎn)物黏度大,成塊嚴(yán)重,且有濃郁的枯草腐敗味。釀酒酵母在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生CO2、酒精和水,發(fā)酵產(chǎn)物氣味香甜。因此采用復(fù)合菌發(fā)酵可改變單一使用枯草芽孢桿菌-1發(fā)酵的氣味,從而提高棉粕的應(yīng)用效果。
在常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分中,CP、EE和粗纖維是評(píng)定棉粕質(zhì)量的幾個(gè)重要指標(biāo)。金紅春等、鮑振國(guó)及孫煥林等通過(guò)研究復(fù)合芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌發(fā)酵棉粕發(fā)現(xiàn),發(fā)酵后CP含量均顯著提高。本試驗(yàn)中,枯草芽孢桿菌發(fā)酵極顯著提高了棉粕的CP含量,一方面可能是由于微生物在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)向胞外分泌多肽和酶蛋白等物質(zhì),且大量生長(zhǎng)繁殖使菌體蛋白增多,因而提高了CP的含量,另一方面可能是由于發(fā)酵消耗了碳水化合物等物質(zhì),導(dǎo)致發(fā)酵產(chǎn)物的總質(zhì)量減少,從而CP含量顯著提高。研究發(fā)現(xiàn),利用由乳酸菌與酵母菌等主要有益菌組成的復(fù)合菌發(fā)酵棉籽殼,可使NDF和ADF含量降低。本試驗(yàn)結(jié)果表明,發(fā)酵棉粕中ADF、NDF、EE的含量降低,這主要是由于微生物在生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中能夠分泌纖維素酶和脂肪酶,并且利用這些纖維素酶分解纖維素、半纖維素和木質(zhì)素,將其轉(zhuǎn)化為寡糖,使粗纖維含量降低,同時(shí)脂肪酶分解EE,使EE含量也降低;發(fā)酵后棉粕DM和Ash含量提高,可能與發(fā)酵底物中加人7%糖蜜有關(guān),也可能與糖和脂類等有機(jī)物在發(fā)酵過(guò)程中消耗而引起礦物質(zhì)累積有關(guān):微生物在生長(zhǎng)代謝過(guò)程中消耗能量,使能量物質(zhì)減少,Ca和P在干物質(zhì)中的比例就相對(duì)提高。
發(fā)酵飼料中氨基酸含量的高低是蛋白質(zhì)飼料品質(zhì)好壞的一個(gè)重要指標(biāo)。在本試驗(yàn)中,各試驗(yàn)組總游離氨基酸均比對(duì)照組有大幅提高,說(shuō)明微生物發(fā)酵可以將棉粕中大分子蛋白降解為小分子蛋白及游離氨基酸,從而提高棉粕中總游離氨基酸的含量。研究發(fā)現(xiàn),以復(fù)合芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵棉粕,發(fā)酵后總游離氨基酸提高了9.98%。王曉玲等利用枯草芽孢桿菌ST-141與釀酒酵母N5對(duì)棉粕進(jìn)行混合菌固態(tài)發(fā)酵,結(jié)果發(fā)現(xiàn),氨基酸總量上升22.2%,必需氨基酸含量增加28.4%。劉俊等以混合菌發(fā)酵棉粕發(fā)現(xiàn),各游離必需氨基酸含量均有較大提高,總游離必需氨基酸由0.65%提高到了24.00%。吳偉偉等利用黑曲霉和釀酒酵母混合固態(tài)發(fā)酵棉籽餅粕,結(jié)果表明,17種游離氨基酸總量較發(fā)酵前增加了30.10%,必需氨基酸中賴氨酸、蛋氨酸和蘇氨酸分別較發(fā)酵前提高了31.03%、25.00%和44.23%。綜上所述,微生物發(fā)酵可以使棉粕中總游離氨基酸含量更加豐富,有效改良棉粕的品質(zhì),提高其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。
食品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《大豆肽粉GBT 22492》2008版將小肽的標(biāo)準(zhǔn)由<10ku降低到<5ku。其檢測(cè)原理:高分子蛋白質(zhì)在酸性條件下易被沉淀,相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)水解物(酸溶蛋白質(zhì))可溶于酸性溶解液(其中包含肽及游離氨基酸)。樣品經(jīng)酸化后,濾液中的酸溶蛋白質(zhì)含量減去游離氨基酸含量即為肽含量。常磊及亓秀曄等研究了枯草芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和植物乳酸菌復(fù)合菌發(fā)酵棉粕的效果,結(jié)果表明,酸溶蛋白質(zhì)含量分別達(dá)到了22.49%和23.54%。卜小麗等以枯草芽孢桿菌與酵母菌(2:1)混合菌發(fā)酵棉粕,小肽含量為11.13%,較發(fā)酵前提高了20.19%。李全豐對(duì)比了植物乳桿菌、產(chǎn)阮假絲酵母菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉4株菌在生料固態(tài)發(fā)酵棉籽蛋白粉制備小肽中的差異,結(jié)果發(fā)現(xiàn),植物乳桿菌可以使發(fā)酵棉籽蛋白粉中小肽含量從0.41%增加到5.36%。劉俊等通過(guò)單菌及組合菌發(fā)酵發(fā)現(xiàn),最適菌種組合為B.Subtilis(H1)和A.niger(P1)。兩菌株復(fù)合發(fā)酵后,小分子多肽含量提高了11%。吳勝華等利用兩種芽孢桿菌加上乳酸菌和酵母菌,采用固態(tài)發(fā)酵制備小肽,小肽總含量由1.6l%提高到12.01%(DM基礎(chǔ))。劉建成研究表明,在優(yōu)化的最佳發(fā)酵條件下,棉粕寡肽的生產(chǎn)量可達(dá)32.13%。本試驗(yàn)最終結(jié)果顯示,枯草芽孢桿菌-1發(fā)酵、釀酒酵母發(fā)酵和復(fù)合菌發(fā)酵后棉籽肽含量分別由發(fā)酵前韻3.21%提高到發(fā)酵后的27.19%、15.84%和20.34%,說(shuō)明枯草芽孢桿菌-1降解棉粕大分子蛋白為棉籽肽效果最好。以上研究結(jié)果表明,微生物發(fā)酵棉粕可以更好地將大分子蛋白質(zhì)降解為小分子棉籽肽。
在現(xiàn)有的小肽分子質(zhì)量分布檢測(cè)方法中,最準(zhǔn)確的可以測(cè)定出小肽含量和小肽分布情況的是利用高效液相色譜測(cè)定。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,棉粕原料的蛋白質(zhì)分子質(zhì)量較大,分子質(zhì)量在1000u以上的占23.41%,1000u以下的占76.59%。而通過(guò)枯草芽孢桿菌-1、釀酒酵母發(fā)酵和復(fù)合菌發(fā)酵之后,1000u以上和1000u以下的峰面積百分比分別為10.6%、22.39%、15.42%和89.41%、77.61%、84.58%,據(jù)此推測(cè),微生物發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的酶類可將棉粕中大分子蛋白質(zhì)降解為小分子棉籽肽和游離氨基酸。劉俊篩選得到了改良棉粕蛋白質(zhì)價(jià)值效果較好的4株菌混合物,利用其發(fā)酵后,平均分子質(zhì)量在66ku附近的棉粕蛋白質(zhì)被降解至14ku 以下。孫煥林等對(duì)枯草芽孢桿菌發(fā)酵棉粕的營(yíng)養(yǎng)特性進(jìn)行研究,結(jié)果顯示:分子質(zhì)量為
在本試驗(yàn)中,枯草芽孢桿菌-1發(fā)酵棉粕CP、DM、總游離氨基酸、酸溶蛋白質(zhì)及棉籽肽的含量顯著提高,同時(shí)可有效將棉粕中大分子蛋白降解為小分子多肽和游離氨基酸,然而其發(fā)酵產(chǎn)物硬度大,難以粉碎,有很濃郁的枯草腐敗味??莶菅挎邨U菌-1和釀酒酵母復(fù)合菌發(fā)酵顯著提高了棉粕中Ca、P、DM、Ash、總游離氨基酸、酸溶蛋白質(zhì)及棉籽肽含量,降低了EE和ADF含量,發(fā)酵產(chǎn)物有濃郁的酒香味,在一定程度上提高了其適口性。從發(fā)酵棉粕的適口性來(lái)說(shuō),復(fù)合菌發(fā)酵優(yōu)于枯草芽孢桿菌-1和釀酒酵母單獨(dú)發(fā)酵,從發(fā)酵棉粕營(yíng)養(yǎng)價(jià)值來(lái)說(shuō),枯草芽孢桿菌-1發(fā)酵優(yōu)于復(fù)合菌和釀酒酵母發(fā)酵。
相關(guān)鏈接:99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑,更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑,簡(jiǎn)單好用的中草藥發(fā)酵劑
相關(guān)鏈接——
①.99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑,更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑,簡(jiǎn)單好用的中草藥發(fā)酵劑
②.99多功能飼料發(fā)酵劑,酶菌結(jié)合飼料發(fā)酵劑中的佼佼者,幾項(xiàng)數(shù)據(jù)對(duì)比讓你信服
③.【視頻】部分發(fā)酵飼料養(yǎng)豬雞鴨帶給你無(wú)臭味健康無(wú)抗養(yǎng)殖效果
④.【視頻】發(fā)酵豆渣養(yǎng)豬新技術(shù)
⑤.御瘟湯——防控非洲豬瘟增加自制發(fā)酵中草藥體內(nèi)外運(yùn)用的原生中草藥配方
⑥.動(dòng)物促生長(zhǎng)增肥原生中草藥組方——效果直觀可見(jiàn),生長(zhǎng)速度提高顯著,降低料耗提前出欄
⑦.“土味十足”原生中草藥配方——效果顯著的動(dòng)物肉蛋品質(zhì)改良中草藥配方,比放養(yǎng)更土味十足
⑧.效果極佳的“多功能增強(qiáng)型雙黃連散”原生中草藥組方
⑨.一種快速促進(jìn)豬雞鴨快速生長(zhǎng)增重的中草藥配方和運(yùn)用方法
10.豬場(chǎng)復(fù)產(chǎn)成功案例,防控非洲豬瘟運(yùn)用自制發(fā)酵中草藥更易成功,不需大設(shè)施投入成本低廉
11.創(chuàng)業(yè)養(yǎng)殖場(chǎng)先種好牧草,享受政策和降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)路更寬
12.2020年多年生禾本科高產(chǎn)牧草品種推薦,亞熱帶與大棚內(nèi)可四季產(chǎn)出,提供專業(yè)種植、加工、利用、形成生態(tài)循環(huán)一條龍服務(wù)
14.新建豬場(chǎng)用哪種模式好?新型水泡糞技術(shù)模式節(jié)約30%以上建設(shè)成本與減少70%以上糞污處理環(huán)保建設(shè)
15.豬場(chǎng)復(fù)養(yǎng)如何才能成功?推薦自制發(fā)酵中草藥組合拳模式!數(shù)百成功案例歡迎驗(yàn)證
16.豬場(chǎng)發(fā)現(xiàn)疑似感染非洲豬瘟后如何快速控制下來(lái)(20余天達(dá)到滿意效果,有大量成功案例)
17.養(yǎng)殖場(chǎng)托管找廣西助農(nóng)公司,無(wú)專業(yè)技術(shù)員也能夠高效益生產(chǎn),總有一種模式適合你
18.養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)保與糞污資源化利用找廣西助農(nóng)公司,聯(lián)系我們
廣西助農(nóng)畜牧科技有限公司提供全方位支撐
2020年已全面禁抗,我們之前經(jīng)常在飼料中添加的抗生素進(jìn)行促生長(zhǎng)行為將是違法,否則面臨巨額罰單。如何既能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)又能夠形成無(wú)抗養(yǎng)殖呢?其實(shí)中草藥在促進(jìn)畜禽養(yǎng)殖健康和生長(zhǎng)、改善肉蛋奶品質(zhì)大有可為,特別是將中草藥發(fā)酵后效果提升4-28倍等好處,這個(gè)實(shí)施方案比你想象中效果更好,運(yùn)用的沒(méi)有不被效果折服的,值得嘗試驗(yàn)證
我們的技術(shù)僅需在出欄前半個(gè)月左右運(yùn)用益生菌+酶制劑+中草藥相關(guān)的無(wú)違禁安全產(chǎn)品,肉質(zhì)改善非常顯著,且可以批量化生產(chǎn)。
目前我們已經(jīng)有了成熟的技術(shù)、產(chǎn)品和運(yùn)用方案,且有大量成功案例,可以在短時(shí)間、批量化、安全無(wú)違禁地為您的養(yǎng)殖場(chǎng)生產(chǎn)出高品質(zhì)的家畜、家禽、水產(chǎn)產(chǎn)品。
規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖公司我們提供產(chǎn)品樣品、驗(yàn)證效果和通過(guò)檢測(cè)后您再放心地規(guī)?;\(yùn)用。
微信公眾號(hào):gxzn-99
微信號(hào):gxzn07713815862
電話:0771-2204816,3800156,3815862
網(wǎng)站:www.fjc001.com, www.zn99.com
微店:weidian.com/?userid=1353707843
產(chǎn)品購(gòu)買微信轉(zhuǎn)賬請(qǐng)?zhí)砑?/span>18076549930或15578100088為好友(還可以咨詢技術(shù)與業(yè)務(wù)問(wèn)題)
- 上一篇:母豬不吃料,什么原因?如何解決這一問(wèn)題? [2021-03-31]
- 下一篇:牛羊前胃遲緩、不反芻、不倒嚼、嘔吐、脹氣拉稀的防治 [2021-03-31]